果蝇遗传实验报告.docx

经典遗传学综合性实验10农生1班第一组 卢**摘要 通过一次杂交实验完成果蝇的单因子实脸、双因子的自由组合、三点测交及伴性遗传这4个独立杂交实验。果蝇的分类：昆虫纲，双翅目，果蝇科，果蝇属。果蝇属(Drosophila)有3000多种，我国已发现800多种，遗传学研究中常用的是黑腹果蝇（D.melanogaster)。果蝇形体小，生长迅速，繁殖率高，饲养方便，世代周期短（12天可繁殖一代），突变性状多，染色体数目少，基因组小，实验处理方便，容易重复实验，便于观察和分析,是遗传学、细胞生物学、分子生物学、发育生物学等研究中的模式动物。关键词 黑腹果蝇 单因子实验 双因子实验、三点测交 伴性遗传1引言果蝇在25℃条件下，羽化后的雌蝇一般在8小时后开始交配，两天后开始产卵。受精卵经22～24小时就可孵化成幼虫。幼虫生活4天左右即开始化蛹，化蛹前的三龄幼虫停止摄食，爬到相对干燥的表面（如培养瓶壁），起初颜色淡黄、柔软，以后逐渐硬化变成深褐色，此时即将要羽化了。刚从蛹壳中羽化出来的果蝇，虫体较肥大，呈半透明的乳白色，约1小时，蝇体即变为粗短椭圆形，双翅伸展，体色加深。遗传规律的实质：①在杂交试验中，配子形成和受精时染色体的行为跟基因的行为是一致的；②在形成配子的减数分裂过程中，凡是同源染色体及其负载的等位基因间要彼此分离，非同源染色休及其负载的非等位基因间要自由组合；③四线期伴随着同源染色休的非姊妹染色单休间片段的交换，导致连锁群的等位基因间要发生一定的重组；④位于性染色体上的基因其遗传行为与性别有关。材料与方法2.1．1材料：黑腹果蝇，基本性状：（6#）小翅、灰身、白眼、焦刚毛；（e#）长翅、黑体、红眼、直刚毛。2.1.2用具：显微镜、白瓷板、毛笔、麻醉瓶、培养瓶和恒温培养箱2.1.3试剂：乙醚、无水乙醇、玉米粉、蔗糖、酵母、琼脂、丙酸。2.2实验步骤2．2．1果蝇培养基制备普通培养基制备。基础培养基：A:蔗糖12.4g、琼脂1.24g、水76mL，煮沸溶解。B：、玉米粉16.5g、水76mL，搅匀。A与B混合，加热煮至糊状，待稍冷却加入1.4g酵母和1.0 mL丙酸，搅拌均匀分装。每管培养基厚度约2.0 cm。2. 2. 2 分离定律的验证。亲本正反交①正交：父本(e)：长翅、黑体、红眼、直刚毛母本(6)：小翅、灰身、白眼、焦刚毛；②反交：父本：小翅、灰身、白眼、焦刚毛；母本：长翅、黑体、红眼、直刚毛。注：母本均取8 h 内羽化未交配的雌蝇。转移亲本杂交6—7d后，F1幼虫出现，将杂交瓶中的成虫全部转移，要注意除净亲本成虫。 F1性状观察（伴性遗传）3—4d后，出现F1成蝇，观察F1的分别统计正反交F1成蝇的性状和性别，记录在表。2. 2. 3 自由组合的验证F1自交取8 h 内羽化未交配F1的成虫，在乙醚麻醉下选雌雄各5只，饲养于基础培养基中，使之随机交配。转移亲本杂交6—7d后，F2幼虫出现，将杂交瓶中的成虫全部转移，要注意除净亲本成虫。观察记录F2的表现型及雌雄体的个数2. 2. 4 三点测验计算遗传距离F1测交取8 h 内羽化未交配F1的雌蝇与三隐性雄果蝇(6号)各5只进行随机交配。转移亲本杂交6—7d后，F2幼虫出现，将杂交瓶中的成虫全部转移，要注意除净亲本成虫。观察记录F2的表现型及雌雄体的个数。2. 5统计分析3 数据记录表1 F1代表现型记录统计项目交配方式F1的表现型数目正交雌性红眼长翅直刚毛灰体110雄性白眼小翅焦刚毛灰体127反交雌性红眼长翅直刚毛灰体123雄性红眼长翅直刚毛灰体99表2 测交后代各表现性及雌雄性记录表现型 基因型 雌性雄性总数白眼、小翅、焦刚毛Wmsn412970红眼、长翅、直刚毛+++383775红眼、小翅、焦刚毛+msn15924白眼、长翅、直刚毛w++10515红眼、小翅、直刚毛+m+5611白眼、长翅、焦刚毛w+sn8816红眼、长翅、焦刚毛++sn235白眼、小翅、直刚毛wm+123总3 F2代的表型及数目表型红眼灰体白眼灰体红眼黑体白眼黑体数目1486250234 数据分析表4 F1代表现型及其数目分析交配方式F1的表现型EOx2正交雌性红眼长翅直刚毛灰体110118.50.736364雄性白眼小翅焦刚毛灰体127118.50.503937反交雌性红眼长翅直刚毛灰体1231111.075203雄性红眼长翅直刚毛灰体991111.578283正交：父本(e)：长翅、黑体、红眼、直刚毛母本(6)：小翅、灰身、白眼、焦刚毛；反交：父本：小翅、灰身、白眼、焦刚毛；母本：长翅、黑体、红眼、直刚毛。从正反交的F1代表现型可以看出F1代均出现了性状的分离，符合孟德尔分离定律。从正反交的结果来看F1代表现型不一样且基本不符合雌雄比例为1:1的比例