基因工程7dna序列分析.pptx
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第九章 DNA序列分析;DNA测序方法：;第一节 Maxam-Gilbert 化学降解法;一、基本原理;二、化学降解测序法的基本步骤;第二节 Sanger双脱氧链终止法;以待测单链或双链DNA为模板，使用能与DNA模板结合的一段寡核苷酸为引物，在DNA聚合酶的催化作用下合成新的DNA链。正常情况下的DNA聚合酶催化反应在其反应体系中包含4种脱氧核苷酸，合成与模板DNA互补的新链。当向该反应体系中加入一种双脱氧核苷酸后，在DNA合成过程中ddNTP将与相应的dNTP竞争掺入到新合成的DNA互补链中。如果dNTP掺入其中，则DNA互补链将继续延伸下去；而如果ddNTP 掺入其中，DNA互补链则到此终止。;二、序列分析的基本步骤;2、经典测序方法的反应步骤;三、序列分析的工作模式; PCR测序; 全自动测序;第三节 DNA片段序列测定的策略;3.缺失克隆测序
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