开心散含药血清对皮质酮所致CTX TNA2细胞损伤的保护作用 .pdf

开心散含药血清对皮质酮所致CTXTNA2细胞损伤的保护作

用

温智林;王真真;贺文彬;陈乃宏

【摘要】目的:观察开心散含药血清对皮质酮(corticosterone)损伤大鼠大脑皮质

星形胶质细胞CTXTNA2的影响.方法:制备开心散含药血清(500mg·kg-1)、阳性

药氟西汀含药血清(10mg·kg-1)、普通大鼠血清.细胞实验中采用皮质酮损伤CTX

TNA2细胞建立体外抑郁模型,MTT法检测开心散对皮质酮所致细胞损伤的影响以

及磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol3-kinase,PI3K).信号通路抑制剂的干

预作用;采用WesternBlotting法检验相关信号通路蛋白表达变化情况.结果:皮质

酮浓度为200μmol·L-1时,细胞活力抑制率可稳定在60％,浓度依赖性较好;开心散

含药血清均能够显著提高皮质酮损伤细胞的存活率,而给予PI3K相关通路的抑制剂

后,开心散保护作用被逆转,WesternBlotting结果显示给予开心散含药血清能够逆

转皮质酮损伤后PI3K及蛋白激酶B(proteinkinaseB,AKT)1/2蛋白表达下降的

趋势.结论:开心散含药血清对皮质酮所致的CTXTNA2细胞损伤具有明显保护作用,

其保护机制可能与PI3K信号通路有关.

【期刊名称】《神经药理学报》

【年(卷),期】2014(004)006

【总页数】5页(P1-5)

【关键词】开心散;含药血清;皮质酮;PI3K;CTXTNA2

【作者】温智林;王真真;贺文彬;陈乃宏

【作者单位】山西中医学院,中医脑病学山西省重点实验室脑藏象学山西省高等

学校重点实验室,太原,030619,中国;中国医学科学院,药物研究所神经科学中心,北

京,100050,中国;中国医学科学院,药物研究所神经科学中心,北京,100050,中国;山

西中医学院,中医脑病学山西省重点实验室脑藏象学山西省高等学校重点实验室,

太原,030619,中国;中国医学科学院,药物研究所神经科学中心,北京,100050,中国;

山西中医学院,中医脑病学山西省重点实验室脑藏象学山西省高等学校重点实验

室,太原,030619,中国;中国医学科学院,药物研究所神经科学中心,北京,100050,中

国;湖南中医药大学,长沙,410208,中国

【正文语种】中文

【中图分类】R965

抑郁症是一种以显著而持久的心境低落为主要特征的综合症，是情感性精神障碍的

主要类型，临床上主要表现为情绪低落，兴趣减低，悲观，思维迟缓，缺乏主动性，

自责自罪，饮食、睡眠差，担心自己患有各种疾病，感到全身多处不适，严重者可

出现自杀念头和行为。抑郁症严重危害着人类的健康，至今仍不十分清楚其发病的

确切机理。

开心散始见于唐代孙思邈《备急千金要方》，由人参、远志、茯苓、石菖蒲组成，

主治悲忧不乐、神志不宁、善忘或心悸怔忡、语言无伦等症，与现代医学抑郁症状

非常相似。药理研究表明开心散具有明显的抗抑郁、改善记忆衰退、安神益智的作

用［1］。

星形胶质细胞是神经系统的间质细胞，广泛的分布在中枢神经系统中，参与多种营

养因子的分泌、免疫应答，具有诱导神经细胞发生、分化、支持和保护神经元、调

节神经递质等功能，近来发现，星形胶质细胞的功能障碍在很多神经性退行疾病中

产生重要作用，尤其在慢性应激诱导的抑郁症发病中起着举足轻重的作用［2-3］。

本研究通过皮质酮损伤模拟体外抑郁模型，探讨开心散含药血清的对皮质酮所致星

形胶质细胞CTXTNA2损伤的保护作用。

1.1实验材料

1.1.1实验动物与细胞

实验动物：SD大鼠，♂，体质量180～200g清洁级，动物合格证号：SCXK（京）

2009-0015。细胞：CTXTNA2，美国ATCC细胞库。

1.1.2试剂与仪器

人参、远志、石菖蒲、茯苓，中药配方颗粒，华润三九医药有限公司；盐酸氟西汀

分散片，礼来苏州制药有限公司；DMEM培养基，胎牛血清（FBS），Gibco

BRL公司；BCA蛋白定量试剂盒，北京普利莱基因技术有限公司；丙烯酰胺，

PMSF，TrisAmresco