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海洋微微型蓝细菌肌尾病毒丰度的实时荧光定量pcr分析方法.docx

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海洋微微型蓝细菌肌尾病毒丰度的实时荧光定量PCR分析方法

【摘要】目的：为了实现对海洋微微型蓝细菌肌尾病毒的快速精确定量，本文基于肌尾病毒nrdA基因序列，运用实时荧光定量聚合酶链式反应技术（qPCR），建立一种新型快速灵敏的高通量检测方法，对肌尾病毒丰度进行定量。方法：肌尾病毒nrdA基因片段的合成与扩增，用于连接转化入感受态细胞，培养阳性质粒并制作标准子。以nrdA基因为检测目标，建立并优化qPCR反应条件，获得最优反应体系，制备标准曲线，得到回归方程，建立一个特异灵敏的qPCR检测方法，并应用于海水样品的检测。结果：成功建立qPCR方法，重复性较好，可检测10-107

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