3.1.2重组DNA技术的基本工具课件-高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3.pptx

选择性必修三《生物技术与工程》第3章基因工程第1节重组DNA技术的基本工具第二课时

P67三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”新知识自学(P72-73页）1.分子运输车是什么？2.载体的作用是什么？3.有哪些种类？4.作为载体应具备什么条件？1.作用：2.种类：质粒、噬菌体和动植物病毒等。将外源基因送入受体细胞3.★作为载体所具备的条件①能在细胞中进行自我复制，或整合到受体DNA上，随受体DNA同步复制。②有一个至多个限制酶切割位点③具有标记基因④对受体细胞无毒害作用知识要知道载体

P67三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”1.常用载体是什么？2.质粒有什么特点？3.基因工程操作中，用的是天然质粒吗？4.标记基因的作用？知识要理解质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状双链DNA分子。

P67三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”除了氨苄青霉素抗性基因外，四环素抗性基因，荧光蛋白基因等也可作为标记基因。真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。复制原点目的基因插入位点氨苄青霉素抗性基因外源DNA片段（目的基因）插入其中EcoRⅠSmaⅠ...便于重组DNA分子的筛选1.常用载体是什么？2.质粒有什么特点？3.基因工程操作中，用的是天然质粒吗？4.标记基因的作用？知识要理解

P67三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”除了氨苄青霉素抗性基因外，四环素抗性基因，荧光蛋白基因等也可作为标记基因。真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。复制原点目的基因插入位点氨苄青霉素抗性基因外源DNA片段（目的基因）插入其中EcoRⅠSmaⅠ...便于重组DNA分子的筛选例1.质粒是基因工程中最常用的目的基因运载工具。下列有关叙述正确的是()A.质粒只分布于原核细胞中B.在所有的质粒上总能找到一个或多个限制酶切割位点C.携带目的基因的重组质粒只有整合到宿主细胞的染色体DNA上才会随后者的复制而复制D.质粒上的抗性基因常作为标记基因供重组DNA的鉴定选择例题分析D

标记基因的筛选原理载体上的标记基因一般是某种抗生素的抗性基因，而受体细胞没有抵抗该抗生素的能力。将含有某抗生素抗性基因的载体导入受体细胞，抗性基因在受体细胞内表达，受体细胞对该抗生素产生抗性。在含有该抗生素的培养基上，能够生存的是被导入了载体的受体细胞。也可用荧光蛋白基因做标记重组DNA导入受体细胞不是100%，而且导入率较低三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”

P67三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”例题分析例2.下图为大肠杆菌及质粒载体的结构模式图,据图回答下列问题:?(1)a代表的物质和质粒的化学本质都是,二者还具有其他共同点,如①,②(写出两条即可)。?(2)若质粒DNA分子的切割末端为,则与之连接的目的基因切割末端应为;可使用把质粒和目的基因连接在一起。?(3)氨苄青霉素抗性基因在质粒DNA上称为,其作用是__________________________________。?(4)下列常在基因工程中被用作载体的是(填选项字母)。?A.苏云金杆菌的抗虫基因B.土壤农杆菌中的RNA分子C.大肠杆菌的质粒D.动物细胞的染色体

P67三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”答案(1)DNA能够自我复制具有遗传效应(2)?DNA连接酶(3)标记基因便于重组DNA分子的筛选(4)C

P67四、DNA的粗提取与鉴定知识要知道新知识自学(P74-75页）1.DNA粗提取的原理2.DNA鉴定的原理3.实验材料怎么选取4.用到的试剂有什么作用利用DNA、RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面存在的差异，提取DNA，去除其他成分。1.提取原理：溶解度:②DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，可提纯DNA。①DNA不溶于酒精，细胞中某些蛋白质溶于酒精，初步分离DNA和蛋白质。0DNA溶解度NaCl浓度（mol/L）0.142

P67四、DNA的粗提取与鉴定新知识自学(P74-75页）1.DNA粗提取的原理2.DNA鉴定的原理3.实验材料怎么选取4.用到的试剂有什么作用知识要知道2.鉴定原理：二苯胺有毒，现配现用并用棕色瓶存放在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色。

P67四、DNA的粗提取与鉴定知识要知道新知识自学(P74-75页）1.DNA粗提取的原理2.DNA鉴定的原理3.实验材料怎么选4.用到的试剂有什么作用DNA含量相对较高的生物组织，如新鲜洋葱