204血清结合胆红素.doc

[所属专业] 生化 [项目名称] 血清结合胆红素测定 [适用仪器] HITACHI系列自动生化分析仪 [文件编号] 204 [版本] 第五版 [总页数] 6页 [批准实施日期] 2009年06月09日 [文件有效期] 两年 [复审日期] 2010年06月09日 [复审人]（签名） [文件编写] 陈奉晖 [文件审批者]（签名） [批准日期] 2009年06月08日 [文件发放部门/个人] 医务科（保管者签名） 院长办公室（保管者签名） 医院档案室（保管者签名） 检验科（保管者签名） 专业实验室（保管者签名） 1 检验申请 单独检验项目申请：血清结合胆红素（缩写DBIL）测定；组合项目申请：肝功能测定项目组合。临床医生根据需要提出检验申请。 2标本采集与处理 2.1 标本采集和接收 2.1.1常规静脉采血约2ml，置于含分离胶黄色盖子真空采血管，颠倒混匀5次。 2.1.2真空管外贴条形码作为唯一的标识符。 2.1.3标本采集后及时运送至检验科。由专人负责标本的接收并记录标本的状态。对不合格标本予以拒收，并在“不合格标本拒收反馈记录单”上逐项填写，及时反馈给病区，若为门诊标本，则填写“重抽血复查通知”及时送到门诊服务台。 2.1.4 下列标本为不合格标本 △ 标本量不足。 △ 对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重混浊的标本。 △ 无法读取标本信息（条形码不清晰、不完整或粘贴不规范等原因）。 △ 标本类型与条形码上信息不符 △ 标本容器上无条形码或标签 △ 真空管用错 △ 标本污染 △ 未按标本采集要求采集与送检 2.2 标本处理及保存 2.2.1 标本采集后静置10-20分钟（室温），然后离心5-8分钟（离心力1000G）要求血清与血块被分离胶完全隔离，血清中不能含有颗粒物或微量纤维蛋白。 2.2.2 不能当天检测的标本置2~80C冰箱保存待检测，已完成测试的标本保持完整的识别号，置2~80C冰箱内保存7天后，按污物处理规范作废弃处理。 2.3 标本采集的注意事项 2.3.1 采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。 2.3.2 不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。 3 方法原理 钒酸盐氧化法。血清中直接胆红素易被钒酸盐氧化成胆绿素，在特殊条件下间接胆红素不被氧化，直接胆红素的减少引起在波长450 nm处吸光度的下降，通过测定反应前后吸光度值可求出直接胆红素的浓度。 4 试剂及其他用品 4.1 试剂：钒酸盐氧化法测定总胆红素试剂盒，由日本和光纯药工业株式会社，货号997-22301。 4.2 试剂盒保存：保存于2~350C，不开盖情况下保存至标签的失效期。开盖后放于仪器的试剂仓库冰箱中至少稳定30天。 4.3 试剂盒准备：液态试剂型，即开即用，无特殊准备。 4.4 试剂盒主要成分：氢氧化钠600mmol/L, 酒石酸钾钠32 mmol/L，硫酸铜12 mmol/L，碘化钾30 mmol/L。含有保护剂。 5 校准品与校准模式 5.1 校准品：由罗氏公司提供的校准液（Cat.No,其总蛋白浓度可溯源至美国国家标准技术研究所（NIST）标准参考材料（SRM）470。 5.2 校准类型和校准点数目：线性模式，3个校准点。 5.3 校准周期：校准间隔时间为Full，1d。但在：更换试剂批号或出现质控漂移时；仪器进行全面保养后；仪器的重要零件更换后；均需进行一次校准。 5.4 校准液重建方法：用3.00ml蒸馏水溶解，轻轻混匀，20min后即可使用。 6 质控品与室内质控规则 6.1 质控品采用有美国贝克曼公司提供的两个不同水平定值质控液。 6.2 质控液重建方法：用5.00ml蒸馏水溶解，轻轻混匀，20min后即可使用。 6.3 质控品测定：在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。 6.4 质控规则：采用Westgard多规则质控规则，计算机程序进行检索与判断。 QC数据→12S 不符合—————————————→ 在控，报告结果 符合↓ ↑ 13S不符合→22S不符合→ R4S不符合→41S不符合→10不符合 符合↓ 符合↓ 符合↓ 符合↓ 符合↓ 失控，拒发报告 6.5 如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。 6.6 失控的处理： 6.6.1 发现失控应向科主任或专业主管(组长或负责人)报告,并协同一起分析控制图,确定误差类型,若符合13S,R4S,