GB/T 28976-2012草莓潜隐环斑病毒检疫鉴定方法.pdf

ICS 65. 020. 01 K 中华人民共和 国 国彖标准 GB/T 28976—2012 草莓潜隐环斑病毒检疫鉴定方法 Detection and identification of strawberry latent ringspot virus 2012-12-31 发布 2013-06-01 实施 GB/T 28976—2012 ■ i r ■ ■ i 刖 吕 本标准按照GB/T 1. 1-2009给出的规则起草。 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC 271)提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国上海出入境检验检疫局、中华人民共和国宁波出入境检验检疫 局、中华人民共和国江苏出入境检验检疫局。 本标准主要起草人:杨翠云、于翠、闻伟刚、郑建中、印丽萍、李彬。 T GB/T 28976—2012 草莓潜隐环斑病毒检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了草莓潜隐环斑病毒的检疫鉴定方法。 本标准适用于植物材料，包括无性繁殖材料、种子和苗木中草莓潜隐环斑病毒的检疫鉴定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅注日期的版本适用于本文 件 。凡是不注日期的引用文件 ，其最新版 （包括所有的修改单）适用于本文件。 SN/T 1840植物病毒免疫电镜检测方法 SN/T 2122进出境植物及植物产品检疫抽样 3草莓潜隐环斑病毒基本信息 中文名：草莓潜隐环斑病毒 学 名:strawberry latent ringspot virus 缩写:SLRSV 分类地位：Secoviridae科，温州蜜柑矮缩病毒属CSadwavirus） 草莓潜隐环斑病毒的其他信息参见附录Ao 4方法原理 病毒粒子的形态特征、为害症状、血清学特性和分子生物学特征是检疫鉴定该病毒的主要依据，采 用DAS-ELISA.RT-PCR.实时荧光RT-PCR 、免疫电镜和鉴别寄主反应等方法进行检疫鉴定。 5仪器设备、设施、用具和试剂 5. 1仪器设备 酶标仪、PCR仪、实时荧光PCR仪、超净工作台、电子天平（感量0. 001 g） 、电泳仪、电泳槽、凝胶成 像系统、电子透射显微镜、水浴锅、高速冷冻离心机、超低温冰箱 （一80 °C）、高压灭菌锅、制冰机、微波 炉、涡旋振荡器。 5.2设施 植物隔离检疫圃。 5.3用具 可调式微量移液器 （2 mL.10 卩L 、100 4、200卩L 、1 000 yL）及相应的无RNase吸头、无RNase离 心管、PCR管、研钵、样品袋、标签、银子、放大镜等。 5.4试剂 5.4. 1除有特殊说明外，所有实验用试剂均为分析纯或生化试剂。 1 GB/T 28976—2012 5.4.2 SLRSV抗体、Trizol 、焦碳酸二乙酯(D EPC) 、液氮、三氯甲烷、异戊醇、异丙醇 、乙醇、0-疏基乙 醇、AMV反转录酶、丁 “ DNA聚合酶、DNA相对分子质量标记、漠化乙