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尿素检测作业指导书
1检验目的
规范尿素(Urea)检测试验,确保检测结果准确性和重
复性。
2测定方法
脲酶连续监测法。
3检测原理
脲酶水解尿素生杨氨和二氧化碳,氨在α-酮戊二酸和
还原型辅酶I的存在下,经谷氨酸脱氢酶(GLDH)催化成谷
氨酸,同时还原型辅酶I被氧化成氧化型辅酶I,还原型辅
酶I在340nm处有吸收峰,其一定时间间隔内吸光度下降的
速率与待测样本中尿素的含量成正比。
谷氨酸脱氢酶
尿素+HO2NH+CO
233
脲酶
+
NH+α-酮戊二酸+NADH谷氨酸+NAD
3
4样本
血清、肝素或EDTA抗凝血浆,处理方法见生化标本采
集程序。
稳定性:2~8℃稳定7天。
5仪器和试剂
5.1仪器:美国贝克曼-库尔特DXC800、AU5811全自动
生化仪、迈瑞BS800M生化分析仪。
5.2试剂:由武汉元景商贸公司提供原装贝克曼-库尔
特试剂及迈瑞公司提供的生化试剂(详见试剂说明书),超
过失效期的试剂不能使用。
5.3校准物:Rodan混合校准品,符合WHO标准,贮存、
准备严格遵照其说明书。
5.4质控物:Rodan正常值及病理值质控品,符合WHO
标准,贮存、准备严格遵照说明书。
6校准
6.1仪器校准:每年由该仪器维修工程师参照厂方的技
术规范对仪器进行一次校准。
6.2项目校准:试剂盒在仪器上放置稳定期后;试剂批
号更换后;由质控结果随时决定。
7操作步骤
上机操作,操作程序、质量控制程序见相应生化仪操作
程序。
8参考范围
2.8~8.3mmol/L。
9警告/危急值
未规定。
10性能指标
10.1线形上限:50mmol/L。
10.2精密度:批内CV3%。
10.3准确度:不准确度≤5%。
10.4试剂贮存:试剂密闭避光贮存2~8℃可稳定12个
月;启用后密闭避光贮存2~8℃可稳定1个月。
11干扰因素及变异的潜在来源
11.1抗凝中的铵盐可影响测定的结果。禁用氟化物作
抗凝剂,它能抑制脲酶活性。
11.2标本出现溶血对测定结果有一定影响。
12临床意义
血液尿素浓度增高:分生理性和病理性两方面
12.1生理性尿素浓度增高:高蛋白饮食引起血清素尿
素浓度和尿液排出量显著增高。血清尿素浓度男怀比女性高
0.3~0.5mmol/L,随年龄增加有增高倾向。成人日间生理变
异平均为0.63mmol/L。
12.2病理性尿素浓度增高
12.2.1肾前性:由于失水,血液浓缩使肾血流量减少,
肾小球滤过率减低而致血液尿素浓度增加。
12.2.2肾性:肾小球肾炎、肾病晚期、肾功能衰竭、
慢性肾盂肾炎及中毒性肾炎等影响肾小球滤过的疾病,都可
使血液尿素含量增高。
12.2.3肾后性疾病:所有使尿路阻塞的因素都可引起
血液中尿素含量增高,如前列腺肿大、尿路结石、尿道狭窄、
膀胱肿瘤致使尿道受压等。
12.3血尿素浓度降低:除婴儿、孕妇以及低蛋白高糖
饮食者外,常见于肝功能衰竭患者。