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ALV-JZH-08株gp85蛋白的表达及ALV-J特异性检测方法的建立的开题报告

题目：ALV-JZH-08株gp85蛋白的表达及ALV-J特异性检测方法的建立

一、研究背景

禽白血病病毒（ALV）是一种病毒性传染病，主要感染家禽，给禽类养殖业带来了严重的经济损失。其中，ALV-J是造成家禽养殖业损失最为严重的一种亚型。对ALV-J病毒进行有效、敏感的检测以及研究其结构与功能具有十分重要的意义。

ALV的外壳膜上覆盖着一种被称为gp85的糖蛋白，它是ALV感染靶细胞的主要结构蛋白，也是诱导机体产生免疫应答的抗原，因此可用于研究ALV-J的调查、预防和控制。

二、研究内容及目的

通过利用ALV-JZH-08株的gp85基因进行表达，构建表达系统，生产高纯度的gp85蛋白，建立ALV-J的特异性检测方法，实现对ALV-J的检测、预防和控制。

具体研究内容：

1.构建gp85基因的表达载体，并进行细胞毒性分析，选取适合的表达细胞系。

2.利用重组表达系统生产高纯度的ALV-JZH-08株gp85蛋白。

3.建立ALV-J的特异性检测方法，包括抗原检测和抗体检测。

4.检测不同样品中ALV-J的检测效果，比较本研究新建方法与已有方法的优劣。

三、研究意义

1.提高ALV-J的病原体检测、预防和控制的准确性和速度，为禽类养殖业的健康发展提供科学依据。

2.为ALV-J的研究提供基础资源和技术支持，推动ALV-J的研究和应用。

3.拓展gp85蛋白的应用领域，为疫苗和抗体制备、免疫诊断提供重要基础资源。

四、研究方法

1.蛋白表达载体的构建：将gp85基因克隆到表达载体中，将其转化到适合的宿主细胞中，让细胞内表达gp85蛋白。

2.表达蛋白的纯化：通过亲和层析、离子交换层析等方法，获得高纯度的gp85蛋白。

3.特异性检测方法的建立：包括抗原检测和抗体检测两种方法。

4.样品检测：对不同来源的样品进行检测，比较不同方法的检测效果和特异性。

五、进度安排

1.前期准备：选定gp85基因序列和表达载体，构建表达系统。

2.制备gp85蛋白：构建表达系统，表达重组gp85蛋白，进行纯化。

3.特异性检测方法建立：包括抗原检测和抗体检测两种方法的建立。

4.样品检测与效果比较：收集不同样品，检测gp85蛋白的特异性和灵敏性。

5.论文撰写和答辩准备。

六、预期结果

1.构建gp85蛋白表达系统，获得高纯度gp85蛋白。

2.建立ALV-J特异性检测方法，可用于不同来源样品的检测。

3.对不同样品中ALV-J的检测效果进行比较及分析，验证本研究新建方法的优越性。

4.发表相关研究论文，并顺利完成毕业答辩。

七、参考文献

1.杨明,焦翠,罗鸣,高博,潘雪,吕荣荣等.鸡白血病病毒毒株ALV-J主要外壳蛋白Gp85分析[J].畜牧兽医学报,2015,36(z2):50-54.

2.蒲运华,魏琼琪,裴李珂,刘晨,许存成.鸡白血病病毒毒株ALV-Jgp85基因的生物信息学和分析[J].中国预防兽医学报,2014,36(4):264-267.

3.王书梦,陈永胜,王昌秀,王梅,王雪.鸡白血病病毒关键骨架蛋白GP85的研究进展[J].畜牧兽医学报,2018,49(6):1136-1141.