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5.3细胞培养所需的基本条件

必要的营养

严格的无菌条件

温度

动物细胞培养的基本条件

适宜的pH

合适的培养器皿

渗透压

动物细胞培养的基本条件

环境条件营养条件

无污染的环境

生物安全柜

温度

温度是细胞体外生存的基本条件之一。

动物细胞忍受低温的能力比忍受高温的能力强。

昆虫细胞培养温度25～28℃哺乳动物细胞培养温度37℃

培养体系pH

动物细胞培养适宜的pH一般在7.2-7.4之间，低于

6.8或高于7.6都不利于细胞的生长。

在培养基中常添加碳酸氢钠和羟乙基哌嗪乙磺酸

（HEPES）来维持体系的pH。

气体环境及溶氧

不同的细胞和同一细胞的不同生

长时期对氧的需求是不同的。

一般细胞在培养初期要求较低的

溶氧水平，而在对数生长期或培

养后期，对溶氧水平要求增加。

在开放培养时，一般把细胞置于

95%空气和5%二氧化碳的混合气体

环境中进行培养。二氧化碳培养箱

渗透压

大多数动物细胞对渗透压的忍耐程度较强。

动物细胞渗透压的维持常采用平衡盐溶液。

平衡盐溶液

营养条件

营养条件主要指对动物细胞培养的培养基要求。

•培养基的基本要求

•天然培养基

•合成培养基

•细胞培养的常用液体

动物细胞培养基

培养基的基本要求

氨基酸：L型同分异构体，以必需氨基酸为主

单糖：六碳糖，如葡萄糖

基本营养成分维生素：提供辅酶和辅基

无机大量：钠、钾、钙、镁、氮、磷等

微量元素:铁、锌、硒、铜、锰、钼、钒等

培养基的基本要求

胰岛素：促进细胞利用葡萄糖和氨基酸

促生长因子氢化可的松：促进表皮细胞的生长

(IGF-1)及激素

泌乳素：促进乳腺上皮细胞生长

动物细胞培养基

天然培养基合成培养基

天然培养基

直接采用取自动物体液或从组织中提取的成分作培养液，主要

有血浆、血清、组织提取液、鸡胚浸出液等。

优点是含有丰富的营养物质及各种细胞生长因子、激素，其渗

透压、pH等与体内环境相似。

缺点是成分复杂、来源受限、制作过程复杂、批次间差异大等。

血浆

鸡胚

血清

天然培养基中最有效和最常用的培养成分。

已知成分主要有血浆蛋白、多肽、氨基酸、维生素、

脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等。

胎牛血清

血清对维持细胞体外生长有哪些作用呢？

提供细胞生长、生存和增殖所必需的激素和生长调节因子