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狂犬病诊断技术标准

狂犬病是由狂犬病毒（Rabiesvirus）引起的一种致命性人兽共患病，早期诊断对防控和减少死亡至关重要。根据世界卫生组织（WHO）及中国《狂犬病预防控制技术指南》，诊断需结合流行病学史、临床表现和实验室检测。以下是核心诊断标准：

一、临床诊断依据

1.流行病学史

有被犬、猫、蝙蝠等可能携带狂犬病毒动物的咬伤、抓伤或黏膜接触史；

未接受规范暴露后预防（如疫苗接种或免疫球蛋白注射）。

2.典型临床表现

狂躁型（约80%病例）：

恐水（吞咽困难、咽喉痉挛）、怕风、畏光；

异常兴奋、攻击性行为、自主神经功能亢进（流涎、多汗）；

病程后期出现瘫痪、昏迷，最终呼吸衰竭死亡。

麻痹型（约20%病例）：

进行性肌肉麻痹，从咬伤部位扩散至全身；

无典型恐水症状，易误诊为吉兰-巴雷综合征。

二、实验室诊断技术标准

1.确诊标准

需通过以下任一项实验室检测确认：

直接荧光抗体检测（DFA）：

金标准，检测脑组织（尸检）或皮肤活检（颈部毛囊处）中的病毒抗原；

阳性结果可直接确诊。

逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）：

检测唾液、脑脊液、脑组织中的病毒RNA；

敏感性高，适用于早期诊断。

病毒分离：

通过细胞培养（如小鼠神经母细胞瘤细胞）分离病毒，耗时较长（需5~7天）；

阳性结果为确诊依据。

2.辅助检测方法

血清中和抗体检测：

检测血清或脑脊液中的病毒中和抗体（如快速荧光灶抑制试验，RFFIT）；

未接种疫苗者：抗体阳性可支持诊断；

已接种疫苗者：需结合临床判断（抗体水平升高可能提示感染）。

病理学检查：

脑组织切片中检出内基小体（Negribodies），但阳性率不足70%。

三、样本采集与处理

1.推荐样本类型

生前诊断：

唾液（连续3天采集，每次5mL）；

颈后部皮肤活检（含毛囊）；

脑脊液（1~2mL）。

死后诊断：

脑组织（取海马回、小脑、脑干等部位）。

2.保存与运输

样本需在4℃冷藏条件下24小时内送检，若延迟需-70℃冷冻保存；

运输遵循生物安全三级（BSL-3）标准。

四、诊断流程

疑似病例：符合流行病学史+典型临床表现；

临床诊断病例：疑似病例+实验室辅助检测（如RT-PCR阳性）；

确诊病例：实验室检测（DFA、病毒分离）阳性。

五、注意事项

早期诊断困难：潜伏期通常1~3个月，症状出现前无法通过常规手段检测；

疫苗接种影响：接种疫苗后可能出现抗体阳性，需结合暴露史和症状分析；

鉴别诊断：需排除破伤风、病毒性脑炎、癔症等疾病；

生物安全：操作病毒样本需在P3实验室进行，避免职业暴露。

六、参考文献

WHO.《狂犬病专家磋商会报告（2018）》

中国疾病预防控制中心.《狂犬病预防控制技术指南（2023年版）》

《中华人民共和国卫生行业标准：狂犬病诊断（WS281-2023）》

总结：狂犬病诊断需以实验室检测为核心，结合临床与流行病学证据。早期识别和规范检测对阻断传播链、降低病死率具有重要意义。