临床生物化学实验室基本知识.pptx

临床生物化学实验室基本知识广医一附院检验科教学内容与教学要求专业技术基本知识常用玻璃仪器常用基本仪器设备常用试剂及纯水临床生化检验样品临床生化检验实验方法临床生化检验质量控制实验数据的有效使用行政管理基本知识实验用纯水天然水含有许多杂质点悬浮物泥沙、藻类、植物遗体等胶体物质粘土胶粒、溶胶等溶解物质Na+/K+/Cl+/Ca++HCO3-/NH3有机物微生物天然水的处理天然水↓简单的物理、化学方法处理，↓除去悬浮物和部分无机盐。自来水↓蒸馏、电渗析等处理，除去杂质。实验用纯水纯水的制备方法蒸馏法：经典方法。理论上为“纯水”，但难除去挥发性物质和微滴。离子交换法：除去水中的阴、阳离子杂质。电渗透析法：除去水中的阴、阳离子杂质。炭吸附法：除去水中的有机物。超滤膜法：除去水中的悬浮物。混合纯水系统纯水的纯度检查指标电导率或电阻率用电导仪或欧姆表测定；电导单位为西门子（S），电导是电阻的倒数；1S=1Ω-1每cm长的电导为电导率（S.CM-1）可溶性硅检验细菌菌落计数美国NCCLS等级纯水的规定 级别Ⅰ级Ⅱ级Ⅲ级微生物含量（最大菌落/ml）10 103 未定pH未定 未定5.0-8.0电阻率 （ MΩ/cm,25℃ ）10 2.0 1.0硅（mgSiO2,最大量）0.05 0.1 1.0 微粒 （μm微孔膜滤过）0.2未定 未定有机物 活性炭过滤 未定 未定NCCLS、CAP规定的等级纯水用途 级别 用途NCCLS Ⅰ 原子吸收、火焰光度、电解质、荧光、酶、 高灵敏度层析、电泳、参比液、缓冲液 Ⅱ 一般实验检验、玻璃器皿冲洗 Ⅲ 玻璃器皿洗涤、要求不高的定性试验 CAP Ⅰ 原子吸收、火焰光度、电解质、血气、酶、 无机元素、参比液、缓冲液 Ⅱ 一般实验检验、血液学、血清学、微生物学 Ⅲ 普通定性、尿液检验、组织切片、寄生虫、 器皿洗涤影响实验用纯水质量的环节制备贮存运输使用所有环节均应避免污染。临床生物化学实验方法的选择与评价教学内容与教学安排实验方法选择与评价的流程实验方法的选择实验方法的评价实验方法选择与评价的流程 ↑→→→ 方法选择 ↑ ↓↑ ↑ 方法评价←←←方法发展 ↑ ↓ ↑ ↑ 常规分析前的准备 预防措施 ↑ ↓ ↑ ↑ 常规分析后的补充 ↑ ↑ ↓ ↑ 诊断性能←←常规分析→→→统计质控→结果报告临床生化实验方法的选择教学内容与教学要求实验方法选择的目的实验方法的分级标准品的分级实验方法选择的原则实验方法选择步骤实验方法选择的目的结合自身的条件，确定合适的、某项目的检测方法；保证拟使用的方法在正式使用前，已了解方法分析性能及可能引入的误差。实验方法的分级决定性方法（definitive method)：准确度最高，系统误差最小，用于评价参考方法和一级标准品。参考方法（reference method）：准确度与精密度已充分证实的分析方法，干扰，系统误差小，用于鉴定常规方法和二级标准品。常规方法（routine method）：性能指标符合临床需要，有适当分析范围，经济实用，用于临床常规标本的检测。应准用确范决定性方法度围参考方法增增加加常规方法三级实验方法的关系图临床生化部分项目的三级方法 决定性方法 参考方法 常规方法钾ID-MS火焰光度法 离子选择电极钠 中子活化法 火焰光度法 离子选择电极总蛋白—— 凯氏定氮法 双缩脲法肌酐ID-MS离子交换层析 苦味酸比色法葡萄糖ID-MS己糖激酶法G氧化酶法AST—— MDH-NADH法 赖氏法ALT—— LDH-NADH法 赖氏法用什么来评价和校正以上方法方法是干什么的？标准物质标准试剂又称标准品，参考物（reference material）它是一种或几种物理或化学性质已经充分确定，可用以校正仪器和某种测定方法的物质。用途是进行方法学评价、仪器校正、常规分析的质量控制等不可缺少的物质。标准试剂的分级一级标准品（原级参考物）：由决定性方法或高度准确的若干方法定值。杂质含量确定，有证书；用于校正决定性方法，评价及校正参考方法，为二级标准品定值。二级标准品（次级参考物） ：由实验室自配