细菌药物敏感性试验及标准化.ppt

2、Plasmid-mediatedAmpCIssuesLaboratoryTesting Detection Falsesusceptibility InfectionControl Notlaboratorybased 第127页,共137页，2024年2月25日，星期天AmpCDiskTestLawnculture:E.coliATCC25922Testisolateondisk第128页,共137页，2024年2月25日，星期天3、碳青霉烯类酶金属酶：几乎能水解所有?-内酰胺抗生素对氨曲南水解能力弱能被EDTA、巯基丙酸抑制第129页,共137页，2024年2月25日，星期天S.maltophiliaImipenemImipenem+EDTA第130页,共137页，2024年2月25日，星期天1天然或固有耐药的菌属或菌种

有些菌属和菌种对某些抗菌药物天然耐药或固有耐药。因此，若药敏试验的结果为敏感应予以怀疑，有必要重复药敏试验和重新鉴定菌种，同时，细菌天然耐药也可作为菌种鉴定的辅助手段之一。表1列举了临床常见细菌的天然耐药表型。第131页,共137页，2024年2月25日，星期天第132页,共137页，2024年2月25日，星期天2罕见耐药谱型影响体外药敏试验结果的因素很多，因此，加强临床微生物实验室的质控工作至关重要。当质控菌的结果在NCCLS要求的允许范围内，所出现的异常或罕见耐药表型应引起实验室工作人员的注意。表2中介绍的耐药谱型在世界范围内均属罕见，如在日常药敏试验中发现并经复试依然出现相同的结果，应该将菌株送到参考实验室进行核实。第133页,共137页，2024年2月25日，星期天罕见耐药谱型第134页,共137页，2024年2月25日，星期天为什么检测耐药基因why１．当MIC值位于或接近折点，表型检测难以确定耐药机制金葡菌：OXA:2-8ug/mlmecA或高水平β-lactamase缓慢水解OXA如能检测到mecA基因，则按MRSA，治疗使用万古霉素，否则使用对青霉素酶稳定的β内酰胺类，或β内酰胺类与酶抑制剂的复合药第135页,共137页，2024年2月25日，星期天２．直接从临床标本检测耐药基因或与耐药相关的基因突变，旨在获得培养结果前指导用药肺炎链球菌：检测到pbpA,pbp2b基因的突变，提示对β内酰胺类敏感性降低且可能对多种药物耐药为什么检测耐药基因why第136页,共137页，2024年2月25日，星期天感谢大家观看第137页,共137页，2024年2月25日，星期天**是耐药监测中重要的一部分，是保证监测结果正确的关键**KB法是最常用的方法，从76年就开始应用。到现在已经积累了大量的数据，成为经验用药的主要依据，所以成为耐药监测最常用的方法，十分重要。**将干燥的浸有一定浓度抗菌药物的滤纸片放在已接种一定量某种细菌的琼脂平板上。经培养后，可在纸片周围出现无细菌生长区，称抑菌环。测量抑菌环的大小，即可判定该细菌对某种药物的敏感程度。**直径150mm的培养皿应倒60-70ml,而100mm直径的可倒25-30ml。(注意:厚度应均匀一致)e.培养基应于制备后七天内使用，但若采取了充分的防范措施，减缓了琼脂干燥，如使用了塑料包装，和用质控菌株进行试验，结果仍然正确，则可延长使用。f.每批平板都应抽样，在30-35℃孵育24小时或更长时间以检查其无菌性。胶化后，琼脂培养基在室温下PH值应为7.2-7.4.PH值过低----某些药物会失效（如氨基糖甙类与大环内脂类），而另一些药物活性可能增强（如青霉素类）。若PH值过高，也可发生上述情况。胸腺嘧啶核苷或胸腺嘧啶的影响含过量胸腺嘧啶核苷和胸腺嘧啶的培养基---逆转黄胺类和甲氧苄啶的抑菌效应---抑菌圈变小变模糊---假耐药报告---使用胸腺嘧啶核苷含量尽可能低的M-H琼脂.评价M-H琼脂:甲氧苄啶/SMZ纸片--粪肠球菌ATCC29212或粪肠球菌ATCC33186进行试验--质量好的培养基上可出现一个边缘清楚的抑菌圈，直径为20mm或更大。质量差的培养基上可能没有抑菌圈，可能在抑菌圈内有菌生长，也可能抑菌圈直径小于20mm。二价阳离子含量变化的影响镁和钙的含量变化---可影响氨基糖苷类和四环素对铜绿假单胞菌的试验结果。含量变高抑菌圈会变小，含量过低，抑菌圈会大的不可接受。锌离子可能会影响细菌对碳头孢烯的敏感性。