单克隆抗体的人源化.pdf

6.3单克隆抗体的人源化

鼠源性单抗存在的问题

鼠源性单抗容易产生人抗鼠抗体(HAMA)，在体内作为异源蛋白

被清除掉，从而削弱其治疗的有效性。

鼠源性单抗在人体内生物活性降低，不能有效地激活人体的生

物效应。

获得低免疫原性、高效性和人源性的单克隆抗体成为当前

研究目标和热点。

人源性单克隆抗体构建的基本思路

通过病毒转化、细胞融合或基因工程改造，使其和人体内的抗

体分子具有极其相似的轮廓，从而逃避人免疫系统的识别，避

免诱导HAMA反应。

保持抗体的亲和力和特异性

遵守两个原则

降低或消除抗体的免疫原性

单克隆抗体技术发展的四个阶段

第一代：鼠源性单克隆抗体

（momab，莫单抗）

第二代：嵌合性单克隆抗体

（ximab，昔单抗）

第三代：人源化单克隆抗体

（zumab，珠单抗）

第四代：全人源单克隆抗体

（mumab）

第一代：鼠源性单克隆抗体

主要是将来源于免疫接种过的小鼠B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融

合，继而筛选出既能无限增殖又能分泌抗体的鼠杂交瘤细胞，

进而进行筛选、抗体制备和抗体纯化。

应用限制

半衰期变短

识别

人抗鼠

鼠源性单抗疗效减弱

抗体反应

人体免疫系统不良反应

代谢较快放射性元素标记的单抗药物

第二代：嵌合性单克隆抗体

用人的恒定区取代小鼠的恒定区，保留鼠单抗的可变区序列，

形成一个人-鼠杂合的抗体。

优点：研制程序快，大幅度降低异源抗体的免疫原性，几乎保

持亲本鼠单抗全部的特异性和亲和力；还具有人抗体的效应功

能，如补体固定、抗体依赖细胞介导的细胞毒性作用等。

缺点：由于嵌合抗体可变区大约占整个抗体的30%，所以鼠源性

抗体可变区中的框架区仍残留一定的免疫原性，仍可诱导人抗

鼠抗体反应。

第三代：人源化单克隆抗体

用现有的无数已详细分析过的小鼠抗体，取其与抗原直接接

触的那段抗体片段（互补决定区，也称CDR）与人的抗体框架

嫁接，经亲和力重塑，可维持其特异性和大部分的亲和力，

同时几乎去除免疫原性和毒副作用。

第四代：全人源单克隆抗体

抗体可变区和恒定区都是人源的，去除了免疫原性和毒副作用。

制备技术主要有：人杂交瘤技术、EB病毒(EBV)转化B淋巴细胞

技术、噬菌体展示技术、转基因小鼠抗体制备技术和单个B细胞

抗体制备技术等。

人源化和全人源抗体药物因其具有高亲和力、高特异性、毒

副作用小的特点，克服了动物源抗体及嵌合抗体的各种缺点，已

经成为治疗性抗体药物发展的必然趋势。

抗体库筛选技术制备人源化单克隆抗体

抗体库筛选技术：噬菌体表面展示技术和核糖体展示技术。

噬菌体表面展示技术

在体外建立一个相应于体内B淋巴细胞库的抗体库，从中筛选出所需要的抗体。

人B淋巴细胞的mRNA

获得抗原特异性的噬菌体抗体

逆转录

多次吸附-洗脱-扩增

人B