《组培实验室的构建》PPT课件.ppt

超净工作台 三．接种工具：常用的有双筒实体显微镜、镊子、剪刀、解剖刀、酒精灯等。? 四．培养设备：常用的有空调机、定时器、温度控制器、增湿和去湿机、培养瓶、培养架、摇床或旋转床、日光灯、光照培养箱等。 五．化学实验及分析设备：天平、酸度计、蒸馏水器、烘箱、电炉、药品柜、冰箱、废污物桶等。 六．培养物细胞学观察设备：主要包括显微观察设备、组织切片染色用设备、照相冲洗设备。 七.微孔过滤器（细胞过滤器） ：激素用于灭菌。 附1：玻璃器皿的选择与清洗 一．玻璃器皿的选择： 培养用的玻璃器皿：试管、三角瓶、培养皿、果酱瓶等等； 显微镜下观察用的：细胞微室、载玻片、培养皿等。 二．玻璃器皿的清洗： 1．洗涤剂：肥皂、洗洁精、洗衣粉和铬酸洗涤剂。一般用洗衣粉即可。 2．新购置的玻璃器皿由于它们或多或少含有游离碱性物质，使用前先用1%稀盐酸内浸泡一夜，然后用肥皂水洗净，清水冲洗，最后用蒸馏水冲淋一便，干后备用。 3．对已被霉菌等杂菌污染的玻璃器皿则必须现在121℃高压蒸汽灭菌30分钟后再清洗。 4．洗净的玻璃器皿应透明发亮、内外壁水膜均匀，不挂水珠。 附2 、组培室的卫生与灭菌 一、灭菌用品、用具 ：2%新洁尔灭、高锰酸钾、甲醛、70%酒精、喷雾器、水桶、工作服、口罩和手套 二、灭菌方法 1、打扫卫生。 2、地面、墙壁和工作台的灭菌 ：(1)配方:取新洁尔灭原液20ml，加水980m1，配成2%新洁尔灭溶液。 (2)方法:将配好的2%新洁尔灭溶液倒入塑料桶内。把喷雾器的主体插入溶液中，并加压，握着喷雾器的喷杆进行均匀地喷雾。在喷房顶时，要特别小心，防止药液雾滴掉入眼晴。 3、无菌室和培养室的灭菌 （用甲醛和高锰酸钾熏蒸） （1）配方:每立方米空间用甲醛l0ml加高锰酸钾5g的配比液进行熏蒸。 （2）方法:首先房子要密封。然后在房子中间放一玻璃器皿，将称好的高锰酸钾放入玻璃器皿内，再把已称量的甲醛溶液慢慢倒入，完毕，人迅速离开，并关上门，密封3天 （3）3天后，开启房间，搬走玻璃器皿废液，搞好地面卫生 （4）在己经熏蒸的房间里，用70%酒精纱布擦洗培养架、玻璃台面及工作台 实验安排： 07生物（1）：双周星期二 、14-21：00 班长： 电话： 学习委员： 电话： 第一组：1-20 组长： 电话： 第二组：21-40 组长： 电话： 第三组：41-59 组长： 电话： 07生物（2）：单周星期二、14-21：00 班长： 电话： 学习委员： 电话： 第一组：1-20 组长： 电话： 第二组：21-40 组长： 电话： 第三组：41-57 组长： 电话： 实验准备：每次实验第一个小组，依次循环，每次安排4-5人，具体人员由小组长安排。 准备时间：星期二上午：约定 卫生安排：每次实验最后一个小组，依次循环，具体人员由小组长安排。 植物组织培养实验室构建 组织培养实验室设计 常用设备和器材配置 附：器皿的选择与清洗 附：组培室的卫生与灭菌 组织培养实验室设计 主要内容： 实验室的设计 仪器设备和器皿用具配置 （一）设计规模和原则 1.设计规模：取决于工作的目的。 以工厂化生产为目的…；以科研为目的…； 2.设计原则： 1）.保证无菌操作： 植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。要做到无菌的条件，需要一定的环境、设备、器材和用具。 2）.工作方便：按组织培养程序来没计，避免某些环节倒排，引起日后工作混乱。 3）.培养条件：人工控制温度、光照、湿度等。 一、实验室设计 （二）、组培实验室组成： 标准组织培养室包括: 药品区 洗涤区 制备区 灭菌区 储放区 无菌操作区 培养区 ▼ 可以根据自己的实际条件进行合并 准备室 分区：药品区、洗涤区、制备区、灭菌区、储放区 主要任务： 1. 药品的贮备、称量、溶解、配制、培养基分装。 2. 器具的洗涤、干燥、保存、培养基的灭菌等。 主要设备：药品柜、防尘橱（放置培养容器）、冰箱、天平、蒸馏水器、酸度计、水池、操作台、高压灭菌锅、干燥灭菌器（如烘箱）及常用的培养基配制用玻璃仪器. 详见下图 酸度计 立式高压自动灭菌锅 主要任务：主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序。 主要设备：紫外光源、超净工作台、消毒器、酒精灯、接种器械（接种镊子、剪刀、解剖刀、接种针）等。 无菌操作室（接种室） 无菌操作室 超净工作台