DNA的不同提取方法对转基因产品定值的影响.pdf

第 ??卷 第 ?期? 沈阳师范大学学报 ?自然科学 版?? ???．?????．?? ???????年 ?月? ????????????????????????????????????? ?????????????????????????? ???．?????? 文章编号 ：????— ????????????— ????— ??? ???的不 同提 取 方 法对? 转 基 因产 品定值 的影 响? 王鹏飞???，蒋? 滢?，徐俊锋?，汪小福?，陈笑芸?，缪青梅。，李胡 莹? ??．沈 阳师范大学 化学与生命科学学 院，沈 阳 ??????；? ?．浙江省农业科 学院 农产 品质量标 准研究所 ，杭 州 ???????? 摘? 要 ：国 内外非常重视转基 因产 品的检测 工作 ，主要依 赖于 ??? 的 ???方法进行 检测 ，? 其检测结果可靠 、稳定 、灵敏度 较高 。尤 其在转基 因产 品的定 值实 验 中，荧光 定量 ???的应用起? 到重要的作用 ，但 是 ??? 的质量是保证荧光 定量 ???定值 准确 的关 键 。实验 以 ???? 的克螟稻? 为材料 ，用 ????法 、商品化 的 ???????、??????以及 ???????提 取试 剂盒 ，分 别提取 克螟稻基? 因组 ???，经 过核酸蛋白分析仪初步测定 浓度 、纯度 以及离 子浓度 后 ，分别 以水 稻 内源 基因 ???? 和克螟稻特异性转化体引物及探针 实施 荧光定 量 ???实验 ，以 ???? 克螟 稻为盲 样实施定值 ，来? 确定一种更适合 荧光定量 ???定值 实验 的 ???提取方 法 ，最 终确定 ??????和 ??????? 提取? 试剂盒满足荧光定量 ???对 ???? 的克螟稻标准 物质定值 实验的要 求 。? 关 键 词 ：克螟稻 ；荧光定量 ???；提取方法? 中 图 分 类 号 ：????．?? 文 献 标 志 码 ：?? ???：??．????／?．????．????— ????．????．??．???? ?? 引? 言? 在分子生物学实验 中，植物基因组 ??? 的制备是开展进一步研究 的基础 ，???质量的好坏决定? 了后续试验研究的成败???。目前提取植物基 因组 ???方法很多 ，其 中使用最为广泛方 法有传统的? ????法 、???法、商 品化的提取试剂盒 ??????法 、?????????法 、??????法。由于不同实验材料的? 组 分差 异 ，这 些不 同 的方法所 提 取 的 ??? 质 量也 不 尽 相 同 ，对 后 续 的 实验 结果 也存 在 差 异 ?????。所 以? 很多专家学者都在致力于研究不同的植物 ???提取方法 ，或对现有 的提取方法进行改 良。曹文波???? 通过 向原尿素法中的裂解液 中添加 ???、用预冷 的无水 乙醇代替异丙醇沉淀核酸等研究 出了改 良型?