微生物实验室常用仪器设备操作规程.docx
微生物实验室常用仪器设备操作规程
一
集菌仪操作规程
二
微生物限度测试仪操作规程
三
PH计操作规程
四
电导率仪操作规程
五
电子天平操作规程
六
恒温水浴锅操作规程
七
超声波清洗机操作规程
八
2-8度药品冷藏箱操作规程
九
-25度低温冰箱操作规程
一、集菌仪操作规程
操作规程:
A.取出培养器先检查包装是否完好无损,在无菌室内打开塑料包装袋。
B.将培养器逐个插放在不锈钢座上。
C.将集菌培养器的弹性软管装入智能集菌仪泵头,要求定位准确,软管走势顺畅。
D.打开待检样品的瓶盖插针孔并消毒之,(若检测安瓿样品,先将安瓿颈部消毒,然后打开并将安瓿)样品瓶定位。
E.拔去进样双芯针管之护套,插入样品瓶中,开启集菌仪,实施过滤集菌(应避免双芯针管进气,滤膜被药液浸湿,影响进气)。
F.完成集菌后,若样品含抑菌物质,按药典规范要求适当用冲洗液清洗,清洗方法与集菌过程相同。
G.消毒培养基瓶插针孔处。
H.摘下顶部空气滤器开口的胶塞,套在培养器底口上,用软管夹子,依次开闭软管,开启集菌仪,将培养基泵入指定的培养器内。
I.用夹片夹闭与培养器连接部的软管,留下5~6cm软管,剪除其余部分,并将开口端插在空气过滤器开口上。
J.分别按规定进行培养。
注意事项:
1.每次实验完成后,用无菌水润湿无菌抹布,拧干抹布后擦拭机身,避免溅出的液体在机身上蒸发干燥,干燥过程中可能有微生物滋生;同时溅出的液体完全干燥后,形成的“盐斑”可能腐蚀机身表面。
2.日常对排液槽进行清洁维护,带出无菌室后倒出内部残留液体,使用纯化水冲洗干净后悬挂晾干,下次使用前湿热灭菌后,传递进入无菌室使用。
3.每个季度需对集菌仪进行一次深度维护。由于长期的运行,软管不可避免会脱落碎屑,堆积在集菌仪泵头内,影响转轮转动。
注:定期维护的频次,根据集菌仪实际使用情况来增减。
二、微生物限度测试仪操作规程
操作规程:
A.在超净工作台或其它符合要求的洁净环境下组装上述系统。
B.使用前首先检查开放式过滤器不锈钢底座与主机连接是否松动,若松动,需旋紧。
C.将样品溶液倒置滤杯里,打开截流阀,启动主机电源,滤杯里的样品就会顺支架排出口直接流出,使样品中的微生物与样品分离,微生物被截留在滤膜上。
D.过滤完成后拆开滤器转移微孔滤膜于特定的条件下培养。
F.过滤完成后需及时对滤杯进行清洗,可用含中性洗涤剂的水浸泡,然后用软布类材料进行擦洗(不可用钢丝球或其它可能划伤塑料杯的器材),冲洗干净,自然晾干。若过滤的介质含阳性对照菌,需将过滤器湿热灭菌处理后再进行清洗。
注意事项:
1.试验前取非无菌滤膜(直径50mm)N张,浸泡在纯化水里约5分钟(或者装进3B反复使用过滤器一起湿热灭菌),无菌滤膜可直接使用,无需浸泡。
2.用镊子取出滤膜,平贴在不锈钢网片上,将不锈钢网片放入不锈钢底座里,将螺盖和杯体盖紧组装成一套完整的全封闭过滤培养器。
3.灭菌,用牛皮纸将组装好的培养器包好,放入高压湿热灭菌锅里进行灭菌(按照2015版《中国药典》)的规定进行灭菌。
4.取灭菌好的过滤器至微生物限度检定室,进行微生物限度检验。
5.打开配置好的固体培养基,将过滤好的滤膜平贴在培养基上(滤膜上不可以有气泡产生)
6.按照中国药典的规定进行培养。
三、PH计操作规程
操作规程:
A.清洗电极,放入标准缓冲溶液1中(一般为6.86pH);
B.用度计测量当前标液温度,并在仪器上设置相同的温度值;
C.待pH读数稳定后,按”定位”键,仪器提示”StdyE5”字样,按“确认”键,仪器自动识别并显示当前温度下的标称pH值;
D.按”确认”键即完成一点标定(斜率为100%)。
E.再次清洗电极,并将电极放入标液2中(一般为4.00pH或者9.18pH);
F.再次测量标液2的温度,设置仪器为相同的温度值;
F.待pH读数稳定后,按斜率”键,仪器提示”StdyE5”字样,按”确认”键,仪器自动识别并显示当前温度下的标称pH值;按”确认”键即完成二点标定。
G.如果用户使用其他的标准缓冲溶液进行标定,则可在最后一次确认前,手动调节显示的pH数据至当前温度下对应标液的pH值,然后按“确认”键。
H.经标定过的仪器,即可用来测量被测溶液,被测溶液与标定溶液温度是否相同,所引起的测量步骤也有所不同。具体操作步骤如下:
a.被测溶液与定位溶液温度相同时,测量步骤如下:
用蒸馏水清洗电极头部,再用被测溶液清洗一次;把电极浸入被测溶液中,用玻璃棒搅拌溶液,使溶液均匀,在显示屏上读出溶液的pH值。
b.被测溶液和定位溶液温度不同时,测量步骤如下:
用蒸馏水清洗电极头部被测溶液清洗一次;用温度计测出被测溶液的温度值;按“温度”键,使仪器显示为被测溶液温度值,然后按“确认”键。把电极插入被测溶液内,用玻璃棒搅拌溶液,使溶液均匀后读