生活饮用水中菌落总数测定.pdf
食品微生物
综合技能
生活饮用水菌落总数测定
读劳模故事，学劳模精神
孟根花于2020年荣膺”全国
劳动模范称号。在生产环
思境微生物研究领域，孟根花
政带领她的团队展开了全新探
园索，为实现微生物菌株溯源
地，保障生产加工安全，2015
年开始，她们搜集生产加工
环境中菌株基因图谱。
一、实验目的
1.学会生活饮用水菌落总数测定方法。
2.学会水源水菌落总数测定方法。
二、实验器材
恒温培养箱、恒温水浴锅、灭菌营养琼脂培养基、无菌生理盐
水、灭菌1mL刻度吸管、无菌平皿、酒精灯等。
三、检验标准
项目限量（CFU/mL）检验方法
菌落总数≤100GB5750.12
四、实验原理
水样（水源水需稀释）悬液中的微生物充分分散后，
定量接种1mL到平皿中，与培养基充分混匀，微生物在
培养基中分散而呈单个（理想状态下）存在，一个菌体
长出一个肉眼可见的菌落，计算菌落数可推出菌体数，
最终以菌落形成单位数（CFU）报告。
五、检验程序
六、实验步骤
1.生活饮用水
（1）以无菌操作方法用灭
菌吸管吸取1mL充分混匀的
水样，注入灭菌平皿中。
（2）倾注约15mL已融化并
冷却到45℃左右的营养琼脂
培养基，并立即旋摇平皿，
使水样与培养基充分混匀。
六、实验步骤
1.生活饮用水
（3）每次检验时应做一平行接
种，同时另用一个平皿只倾注
营养琼脂培养基作为空白对照。
（4）待冷却凝固后，翻转
平皿，使底面向上，置于
36℃士1℃培养箱内培养
48h，进行菌落计数，即
为水样1mL中的菌落总数。
六、实验步骤
2.水源水
（1）以无菌操作方法吸取1mL
充分混匀的水源水样，注入盛
有9mL灭菌生理盐水的试管中，
混匀制成1:10稀释液。
（2）吸取1:10的稀释液1mL注入盛有9mL灭菌生理盐水的试管
中，混匀制成1:10稀释液。
六、实验步骤
2.水源水
（3）按同法依次稀释成1:100，1:1000稀释液等备用。如此递
增稀释一次，必须更换一支1mL灭菌吸管。
（4）用灭菌吸管取未稀释的水
样和2个~3个适宜稀释度的水样
1mL，分别注入灭菌平皿内，以
下操作同生活饮用水的检验步骤。
七、结果报告
按GB5750.12进行结果报告。
不同稀释度的平均菌落数两个稀释度菌落总数报告方式
实例/(CFU/mL/(CFU/mL
10-110-210-3菌落数之比))
1136516420