人胚胎骨髓间充质干细胞和单个核细胞静脉移植治疗大鼠脑梗死疗效的比较.pdf

中 国 医学 科 学 院 学 报 ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SINICAE · 论 著 · 人胚胎骨髓间充质干细胞和单个核细胞静脉移植治疗 大 鼠脑梗死疗效的比较 黄爱华 ，张萍萍 ，张 斌 ，马步青 ，关云谦 ，周逸丹 浙江省杭州市第三人民医院急诊科，杭州310000 首都医科大学宣武医院细胞生物室，北京 100053 通信作者：周逸丹 电话 ：0571电子邮件 ：zhouyidanf@163．corn 摘要：目的 比较人胚胎骨髓间充质干细胞 (MSC)和单个核细胞 (MNC)经静脉移植后对脑梗死的疗效。方法 采用大脑中动脉远端凝断法制造大鼠脑梗死模型。将大鼠分为假手术组、缺血对照组 (造模后经尾静脉给予生理盐水)、 MSC组 (造模后经尾静脉给予MSC)和MNC组 (造模后经尾静脉给予MNC)。移植后2d，取脑进行梗死体积测定；移 植后 1、3、5、7d，采用肢体放置测验和平衡木实验进行行为学评价；移植后7d，采用免疫荧光法测量梗死周边纹状体 区激活的小胶质细胞 Iba．1的染色丰度；移植后3、7d，采用ELISA检测移植后梗死灶周边纹状体区胶质源性神经营养因 子 (GDNF)和脑源性神经营养因子 (BDNF)的蛋白水平。结果 缺血对照组、MSC组和MNC组的相对梗死体积分别为 (37．85±4．40)％、(33．41±3．82)％和 (30．234-3．63)％，其中，Msc组 (t：2．100，P=0．034)和MNC组 (t=2．109， P：0．0009)显著低于缺血对照组，MNC组显著低于MSC组 (t=1．743，P=0．043)。移植后1d，缺血对照组的肢体放置 成功率为 (4．32-40．71)％，明显低于假手术组的 (9．73±0．36)％ (t=2．178，P=8．61x10 )；MSC组和MNC组分别 为 (5．09±0．62)％ (t=2．1009，P=0．024)和 (5．90±0．68)％ (t=2．1008，P=0．0001)，明显高于缺血对照组；MNC 组又明显高于MSC组 (t=2．1009，P=0．0165)。MSC组和MNC组损伤对侧前肢错步数 占总步数的百分比分别为 (5．56± 0．86)％ (t=2．120，P=0．020)和 (5．13±0．95)％ (t=2．131，P=0．003)，明显低于缺血对照组的 (6．47±0．61)％。 移植后3d，MNC组的肢体放置成功率为 (6．91±I．10)％，明显高于缺血对照组的 (5．80-40．82)％ (t=2．110，P= 0．027)；MSC组为 (6．30±0．77)％，与缺血对照组差异无统计学意义 (t：2．101，P=0．199)。MNC组损伤对侧前肢错 步数占总步数的百分比为 (4．34±0．58)％，明显低于缺血对照组的 (5．31±0．65)％ (t=2．100，P=0．006)和MSC组 的 (4．92±0．53)％ (t=2．100，P：0．041)，MSC组与缺血对照组差异无统计学意义 (t=2．109，P=0．139)。假手术组、 缺血对照组、MSC组和MNC组的Iba一1相对丰度分别为 1．00+0．00、1．72±0．21、1．23-40．08和 1．48-40．06，其中，缺 血对照组显著升高，为假手术组的 (1．72±0．21)倍 (t=2．262，P=2．9x10 )，MSC组则降低至假手术组的 (1．23± 0．08)倍，比缺血对照组显著降低 (t=2．178，P=3．91x10 )，MNC组降低至假手术组的 (1．48±0．06)倍，比缺血 对照组显著降低 (t=2．200，P=0．007)，MSC组和MNC组问差异也有统计学意义 (=2．120，P=7