溶血性链球菌实验活动生物安全危害风险评估报告.doc

溶血性链球菌实验活动生物安全危害风险评估报告 溶血性链球菌所有的实验活动均应在BSL-2实验室操作 一、?评估对象及分类等级1??溶血性链球菌（Streptococcus hemolyticus）细菌又称乙型溶血性链球菌（β- hemolyticus Streptococcus）和化脓性链球菌（Streptococcus pyogrnes），是链球菌按照是否产生溶血和溶血性质分类，在血平板上产生2~4mm宽的透明溶血环的一类链球菌，可引起人类及灵长类动物多种疾病。 2??根据《中华人民共和国传染病防治法》，由溶血性链球菌引起的传染病列为乙类传染病。 3??在卫生部公布的《人间传染的病原微生物名录》中溶血性链球菌被列为第三类病原微生物。 二、背景资料 1??一般生物学特性 1．1??形态染色? ? 链球菌呈球形或椭圆形，直径0.6-1.0μm，呈链状排列，长短不一，从4-8个至20-30个菌细胞组成不等，链的长短与细菌的种类及生长环境有关。在液体培养基中易呈长链，固体培养基中常呈短链，由于链球菌能产生脱链酶，所以正常情况下链球菌的链不能无限制的延长。多数菌株在血清肉汤中培养2-4h易形成透明质酸的荚膜，继续培养后消失。该菌不形成芽胞，无鞭毛，易被普通的碱性染料着色，革兰氏阳性，老龄培养或被中性粒细胞吞噬后，转为革兰氏阴性。? ?1．2??培养特性? ? 需氧或兼性厌氧菌，营养要求较高，普通培养基上生长不良，需补充血清、血液、腹水，大多数菌株需核黄素、维生素B6、烟酸等生长因子。最适生长温度为37℃，在20-42℃能生长，最适pH为7.4-7.6。在血清肉汤中易成长链，管底呈絮状或颗粒状沉淀生长。在血平板上形成灰白色、半透明、表面光滑、边缘整齐、直径0.5-0.75mm的细小菌落，溶血性链球菌形成透明溶血环。 1．3??生化反应　　分解葡萄糖，产酸不产气，对乳糖、甘露醇、水杨苷、山梨醇、棉子糖、蕈糖、七叶苷的分解能力因不同菌株而异。一般不分解菊糖，不被胆汁溶解，触酶阴性。 1．4??抗原结构　　链球菌的抗原构造较复杂，主要有三种： 1．4．1??核蛋白抗原 或称P抗原，无特异性，各种链球菌均相同。 1．4．2??多糖抗原 或称C抗原，系群特异性抗原，是细胞壁的多糖组分，可用稀盐酸等提取。 1．4．3??蛋白质抗原 或称表面抗原，具有型特异性，位于C抗原外层，其中可分为M、T、R、S四种不同性质的抗原成分，与致病性有关的是M抗原。。 2??在外界环境的稳定性? ? 该菌抵抗力一般不强，60℃30min即被杀死，对常用消毒剂敏感，在干燥尘埃中生存数月。乙型链球菌对青霉素、红霉素、氯霉素、四环素、磺胺均敏感。青霉素是链球菌感染的首选药物，很少有耐药性。 3??致病性溶血性链球菌常可引起皮肤、皮下组织的化脓性炎症、呼吸道感染、流行性咽炎的爆发性流行以及新生儿败血症、细菌性心内膜炎、猩红热和风湿热、肾小球肾炎等变态反应。溶血性链球菌的致病性与其产生的毒素及其侵袭性酶有关，主要有以下几种： 3．1??链球菌溶血素：溶血素有O和S两种，O为含有-SH的蛋白质，具有抗原性，S为小分子多肽，分子量较小，故无抗原性。 3．2??致热外毒素：曾称红疹毒素或猩红热毒素，是人类猩红热的主要毒性物质，会引起局部或全身红疹、发热、疼痛、恶心、呕吐、周身不适。 3．3??透明质酸酶：又称扩散因子，能分解细胞间质的透明质酸，故能增加细菌的侵袭力，使病菌易在组织中扩散。 3．4??链激酶：又称链球菌纤维蛋白溶酶，能使血液中纤维蛋白酶原变成纤维蛋白酶，具有增强细菌在组织中的扩散作用，该酶耐热，100℃50分钟仍可保持活性。 3．5??链道酶：又称链球菌DNA酶，能使脓液稀薄，促进病菌扩散。 3．6??杀白细胞素：能使白细胞失去动力，变成球形，最后膨胀破裂。  4??传播途径实验室传播途径为经伤口感染和呼吸道传播传播。三．实验室实验活动及其危险性与预防措施 1??实验活动内容本实验室主要从事溶血性链球菌检验工作，涉及的内容有： 1．1??溶血性链球菌的传统生化检测； 1．2??溶血性链球菌的药物敏感实验 2??可能造成不良后果的因素与预防措施 2．1??实验样品的前处理? ?? ? 针对目前实验室实际工作情况，可根据待检样品，分为高污染样品和低污染样品，均可能造成实验室感染的因素： 2．1．1??高污染样品——通过流行病学调查证明为疑似的食品或病人样品；——溶血性链球菌纯培养物或冻干菌种、质控、鉴定等实验操作。 2．1．2??低污染样品——委托检验产品（如食品等）；——其他非症状监测的样品；——可能受污染的水样、环境。