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沙眼衣原体诊断研究进展
摘要沙眼衣原体感染在人群中很普遍,
但临床上并未引起重视,本文综述了近年来
诊断沙眼衣原体感染的进展,着重介绍了分
子生物学技术在检测沙眼衣原体中的应用,
并提出了诊断沙眼衣原体的新的扩大的金
标准。
沙眼衣原体感染是发展中国家可预防
的致盲的最重要的原因,也是西方工业化国
家最常见的性病。CT可引起泌尿生殖道感染,
胎儿感染CT可致新生儿结膜炎、新生儿和
小婴儿肺炎,以及其他并发症如获得性反应
性关节炎、Retier’s综合征[1]。由于CT
感染临床表现无特异性,所以常易漏诊。近
年来在确诊CT感染方面进展迅速,本文将
其综述如下。
CT的形态学检查
最初诊断CT感染的实验是吉姆萨染色。
这种方法在CT被分离出来前50年就开始应
用,通过证实被感染细胞内CT包涵体的存
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在而判断是否感染CT。但是由于其敏感性和
标本收集上有困难,未能成为一种常规检测
方法。此种涂片染色的标本要求必须有大量
的上皮细胞,而镜检也较费时,同时也受观
测者的主观影响。在诊断男性尿路感染时敏
感性较低,其阳性率仅为培养证实CT感染
的15%。但是在诊断新生儿CT结膜炎时,
Giemsa染色镜检被认为是简便、易行而敏感
的一种方法,50%-90%的涂片可见胞浆内包
涵体及大量多形核白细胞。也可将刮片标本
用甲醇固定,碘染色后镜检,因CT包涵体
含糖原,遇碘呈棕褐色,即阳性。
CT的细胞培养
1956年我国汤非凡教授首次在世界上
用鸡胚卵黄囊培养CT获得成功。10年后,
组织细胞培养CT成功。从病人组织中分离
CT,长期以来都被作为一种确诊试验,但是
非百分之百敏感,培养失败常由于标本多变
或标本收集方法不当而引起。
培养细胞现多常用McCoy细胞或
Hela-229细胞株,BHK-21细胞也对CT易感。
最初操作时使用X线照射过的McCoy细胞,
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现常用放线菌酮处理过的单细胞层。细胞培
养过程中,起决定作用的一步是将接种物离
心进入培养的单细胞层内,然后所有细胞在
35℃孵育48-72小时,进行Giemsa染色、
碘染色或单克隆荧光抗体染色,在光学显微
镜下寻找CT包涵体。虽然此方法特异性高
达100%。因受标本采集、保存、转运和培养
等许多因素影响,多数研究显示敏感性仅为
52%-92%[]。
CT的抗原检测
一、酶免疫测定此方法是将酶与单克
隆抗体用交联剂结合起来,形成酶标抗体,
检测标本中有无CT抗原。如有CT抗原,则
与酶标抗体发生特异性反应,加入酶的底物,
底物被酶催化生成可溶性或不溶性呈色产
物,即为阳性。可用肉眼或分光光度计定性
或定量,其敏感性为93%-98%,10分钟可出
报告。
二、直接荧光抗体试验此方法是利用
荧光标记的单克隆抗体检测标本中有无CT
抗原。其诊断新生儿CT结膜炎的敏感性高
达95%-100%,2