基因工程及其技术第4课时课件高二下学期生物选择性必修3.pptx

第1节基因工程及其技术

第4课时;利用大肠杆菌生产人类胰岛素，我们已经获取了胰岛素基因，接下来该如何使其在大肠杆菌中稳定存在呢？;二、基因表达载体的构建——核心;a、复制原点;①用一定的限制酶切割载体，使其出现一个切口，露出黏性末端。;补充1：单酶切体系总结：;补充2：双酶切体系总结：;（1）不破坏目的基因：切点应位于目的基因两端，如图甲中可选择PstⅠ，而

不选择SmaⅠ。

（2）保留标记基因、启动子、终止子、复制原点：所选择的限制酶尽量不

要破坏这些结构，如图乙中不选择SmaⅠ。;;1.结合基因表达载体模式图分析以下问题：

(1)图中a、b、c分别代表什么结构？;主要是农杆菌转化法

①农杆菌特点：;③转化过程:;小组讨论：;2.将目的基因导入动物细胞;繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。;1.检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因;2.检测目的基因是否转录出了mRNA;3.检测目的基因是否翻译成蛋白质;4.个体生物学水平的鉴定;1.研究表明，将豌豆早枯病毒(PEBV)的复制酶C端编码序列转入烟草后，转基因烟草会对PEBV表现出抗性。下列说法正确的是

A.该过程需要用到限制酶和DNA聚合酶来构建基因表达载体

B.将豌豆早枯病毒(PEBV)的复制酶C端编码序列导入烟草细胞最常用的

方法是Ca2＋处理法

C.只要在转基因烟草细胞内检测出豌豆早枯病毒(PEBV)的复制酶C端编

码序列就代表成功了

D.检测转基因生物DNA上是否插入了目的基因，可以用DNA分子杂交法;2.在检测抗虫基因是否成功转入棉花基因组的方法中，不属于分子水平的是

A.观察害虫吃棉叶是否死亡

B.检测目的基因片段与DNA探针能否形成杂交带

C.检测目的基因转录形成的mRNA与DNA探针能否形成杂交带

D.检测目的基因表达产物蛋白质能否与特定抗体形成杂交带;1.目的基因的筛选与获取