第四章_病毒课件.ppt

2 、侵入 过程：尾丝展开、释放溶菌酶、尾丝尾鞘收缩、DNA注入 动物病毒借助胞饮作用或直接穿过膜，植物病毒则通过伤口或昆虫刺吸传染 3 、复制与合成 (1)核酸复制 核酸复制 核酸转录 蛋白质合成 DNA病毒(poxvirus)的复制 (2)核酸转录 (3)蛋白质合成 4、 装配 DNA分子的缩合 通过衣壳包裹DNA而形成头部 尾丝和尾部其它部件独立装配完成 头部与尾部相结合 装上尾丝 噬菌体的组装 成熟的病毒粒子从被感染细胞内转移到外界的过程。 没有包膜的病毒合成溶解细胞的酶，引起内裂解。 有包膜的病毒以下图方式进行： 5、 释放 包膜病毒的包膜装配 二、一步生长曲线（one-step growth curve） 利用烈性噬菌体的生活周期, 可以在实验室条件下获得噬菌体的生长曲线。这种用来测定噬菌体侵染和成熟病毒体释放的时间间隔, 并用以估计每个被侵染的细胞释放出来的新的噬菌体粒子的数量的生长曲线称为一步生长曲线。 高浓度敏感细菌 ＋ 适量噬菌体 相混合一定时间 (5min) 除去游离噬菌体 进行高倍稀释 培养 定时取样测定噬菌体数 ★2测定噬菌体一步生长曲线 将低剂量的噬菌体悬液加入敏感细菌的培养液中, 使得一个病毒体与10-100个细菌细胞相混合。 经过短时间的培养使噬菌体吸附在细菌上, 再用抗体或稀释除去未吸附上的噬菌体。 用新鲜培养液把经过上述处理的细菌悬液高倍稀释，以免发生第二次吸附和感染。 培养后定时取样, 将含有噬菌体的样品与敏感细菌培养物混合培养, 计算每个样品在培养基平板表面产生的噬菌斑数目。 以培养时间为横坐标, 噬菌斑为纵坐标, 可以绘出一步生长曲线。 １．潜伏期： ２．裂解期： ３．平稳期： 裂解量= --------------------------------- 裂解期平均噬菌体数 潜伏期平均噬菌体数 潜伏期:从噬菌体吸附菌细胞至菌细胞释出新噬菌体的最短时间。 裂解 期（rise phasse)—宿主裂解，噬菌体数不断增加的时期。 平稳期(plateau phase)—宿主全部裂解，噬菌体达最高点后的时期。 裂解量(Burst phase)—每个被感染细菌释放新的噬菌体的平均数。 ★进行一步生长曲线的测定，能了解噬菌体在菌体内的最短潜伏期，和平均收获量，还可测知理化因素的变化对噬菌体感染循环的时间和对每个被感染噬菌体释放噬菌体的影响。 裂解量= --------------------------------- 裂解期平均噬菌体数 潜伏期平均噬菌体数 ★裂解量 三、温和噬菌体（temperate phages or lysogenic phages） １．感染宿主细胞后不引起宿主细胞迅速裂解的噬菌体称为温和噬菌体。 ★温和噬菌体的特点 1.其核酸的类型都是 dsDNA; 2.具有整合能力； 3.具有同步复制能力。 ★溶源性(lysogeny)------温和噬菌体侵染敏感细菌后不裂解它们，而与细菌共存的特性。 ★温和噬菌体的三种存在形式：游离态 整合态 营养态 溶原细胞:含有温和嗜菌体的细胞称为溶原细菌(或溶原细胞)。 可进行正常生长繁殖,而不被裂解。 前噬菌体:整合在宿主染色体上的噬菌体DNA。 ２．溶原细菌的特点： ①可以自发的消除噬菌体DNA ②可以自发或人工诱发变为烈性噬菌体 ③溶原细胞可失去噬菌体的核酸后复愈 ④溶原细菌对同源噬菌体的感染具有免疫性 ⑤某些溶原细菌可以合成特殊的代谢产物, 如白喉杆菌只有在被λ噬菌体感染形成溶原细菌后才能产生白喉毒素。 ⑥局限性转导 温和噬菌体及其溶原化 ３．溶原细菌的检出： 敏感指示菌：遇到溶原细菌所释放的溶原性 噬菌体会发生裂解的细菌． 少量溶原细菌＋大量敏感指示菌　　　倒平板 培养，中央有溶原细菌，四周有透 明噬菌斑． ⑥★溶源性菌株的检验： 方法：在合适的培养基中培养待测菌样→→在对数期进行紫外线照射，诱导原噬菌体复制→→进一步培养→→过滤培养物，去处活菌体→→滤液与指示菌混合、倒平板（或将滤液加到敏感性指示菌的液体培养物中）→→观察是否有噬菌斑出现（或使菌液变清）. ●敏感性指示菌——遇溶源菌裂解后所释放的温和噬菌体会裂解性生活周期的非溶源性菌株，这