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山东绿都生物科技有限公司
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ELISA试剂盒生产流程及注意事项
1.ELISA试剂盒生产流程
包被 洗板 封闭 烘干装袋 曲线 入库检验
跟踪质
控
2.包被
2.1 将包被抗原用包被缓冲液配制包被液,每孔取100L加入酶标板,盖好盖
板膜,包被条件如下表,4℃ 16-20h包被时酶标板可以叠放,而37℃ 2h包被时
酶标板之间的间距应保持一致 (一般为5cm)。根据培养箱的设计调节酶标板间
的间距,如培养箱从底部产热,则应增加下层酶标板间的间距为10cm 。
2.2 包被加样采取吸二打一的方式,应避免加在孔壁上部,若不慎滴加在孔壁
上,根据该滴溶液是否应加入孔内再做判断,若应加入,则小心振荡使其落入孔
底,反之则用吸水纸小心吸出,并注意不可溅出,不可产生气泡。
2.3 包被前预吸查看枪头是否合格,水流是否一致,不一致者应更换枪头,包
被应采用进口枪头,每包被一块板,应将枪头套紧,并且在包被的过程中要注意
查看吸液是否一致,在包被过程中若出现任何小问题,都应将此块板做出记号,
以便后期组装入库时淘汰。
2.4 若采用37℃ 2h包被模式,则应给酶标板编码,保证每块板子的包被时间一
致。
地址:山东省滨州市黄河二路169号 绿都生物高科技园
网址: 24小时技术服务QQ咨询:524402845
Email:lvdukeji@126.com 邮编:256600
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3. 洗板
3.1 包被后要进行两次洗涤,250微升/孔,洗涤完毕后,应在毛巾上拍干参与液
体,并及时进行下一步封闭。
3.2 洗涤时要注意查看水流是否一致,在洗涤程中若出现任何小问题,都应将此
块板做出记号,以便后期组装入库时淘汰。
4. 封闭
4.1 封闭液应提前一小时取出初步回温,用前摇匀,每孔取180L加入酶标板,
盖好盖板膜,37℃封闭 1.5h, 酶标板之间的间距应保持一致(一般为5cm)。根
据培养箱的设计调节酶标板间的间距,如培养箱从底部产热,则应增加下层酶标
板间的间距为10cm 。
4.2 封闭加样采取吸一打一的方式,应避免加在孔壁上部,若不慎滴加在孔壁
上,根据该滴溶液是否应加入孔内再做判断,若应加入,则小心振荡使其落入孔
底,反之则用吸水纸小心吸出,残留在枪头内的溶液不要打出 以免产生气泡。
并注意不可溅出,不可产生气泡
4.3 封闭前预吸查看枪头是否合格,水流是否一致,不一致者应更换枪头,封闭
应采用进口枪头,每封闭一块板,应将枪头套紧,并且在包被的过程中要注意查
看吸液是否一致,在封闭过程中若出现任何小问题,都应将此块板做出记号,以
便后期组装入库时淘汰。
5. 烘干装袋
5.1 封闭完后,摔倒孔内液体,并在毛巾上拍干,接下来采取烘干或者晾干的方
式彻底干燥酶标板。烘干:37 ℃倒置(不加盖板膜或用自封袋),每5块板烘
干30min,随着板子数量增多时间相应延长,如100块板,需要烘3h,依次类
推;晾干:底部铺一层干净的A4纸或者吸水纸,倒置板子,在顶层铺一层盖住
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避光,室温晾 18-24
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