精品血型鉴定与交叉配血.ppt

【注意事项】 1.如果对患者的输血史或妊辰史不明，必须使用48h内的标本。 2.不能使用溶血标本。 3.配血后，受血者/供血者的全部标本须于2～6℃冰箱保存7d以备复查。 交 叉 配 血（盐水凝集法） 【方法学评价】 本法简易、经济、快速，缺点是仅用于检查ABO血型系统的IgM血型抗体是否相配，不能检出不相配的IgG血型抗体。 交 叉 配 血（盐水凝集法） 2、聚凝胺介质配血法（MPT）※ 【原理】：①聚凝胺是带有高价阳离子的多聚季氨盐，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，减少细胞间排斥力，缩小了其间之距离，出现非特异性凝集。 ②低离子强度溶液降低红细胞的Zeta电位，可进一步增加抗原抗体间的吸引力。 ③枸橼酸盐解聚液可消除聚凝胺的正电荷，使非特异性凝集消散，但IgM或IgG类血型抗体与红细胞产生的特异性凝集不会散开。 主侧配血管 次侧配血管 Dc1滴 PS1滴 PC1滴 DS1滴 主侧、次侧配血管 凝集 不凝集：试剂无效 交叉配血凝聚胺介质法操作示意图 低离子溶液0.6ml 混匀 加凝聚胺2滴，混匀15s 弃去上清 1000r/min 离心1min 加解聚液2滴 镜检判断配血是否相合 1分钟 【方法学评价】 聚凝胺介质法可加快凝集反应速度，使原来在盐水介质中不能凝集红细胞的抗体发生凝集，提高反应灵敏度，能检测IgM、 IgG等引起溶血反应的几乎所有规则与不规则抗体，适用于各类输血患者的配血。故该法具有快速、灵敏、结果可靠、能捡出完全抗体及不完全抗体等优点。 交 叉 配 血（MPT） 【方法学评价】本法是确定不完全抗体最可靠的方法※，但操作较繁琐，需多次洗涤，需要时间长，试剂较贵，故始终未能成为临床常规的配血方法。 交叉配血（抗人球蛋白法） 交叉配血试验的临床意义 1．进一步验证受血者和供血者血型鉴定是否正确，发现ABO系统的不规则抗体，以避免血型鉴定错误而导致的输血后的严重溶血反应。 2．发现其他的血型抗体 受、供血者如果ABO血型相同，但其他血型不同时，在交叉配血时也可出现凝集，为避免异型血输入后的溶血反应，在目前许多实验室都不能进行稀有血型鉴定的情况下，全靠交叉配血发现这些血型的不同及免疫抗体的存在。 3.当受血者一次输血超过1600～2000m1，或在48小时内输入5L或更多血时,称为大量输血,这时就需要多个供血者的血液,在配血时不但受血者和供血者之间要交叉配血,多个供血者之间也应互相交叉配血,为保证受血者的安全，要求主侧、次侧及献血员之间交叉配血均不凝集时，方可输血。 4.在急诊配血时, 对急需情况可采用试管法配血，在15min内发血。对特急情况应立即发给O型浓缩红细胞或低凝集价的O型全血。然后尽快复查血型和配血，如表现有配血禁忌，应立即通知负责医师及时处理。 交叉配血试验的注意事项 1．用于交叉配血的病人（受血者）血液标本应该是抽取的新鲜血，供血者的标本是刚从血袋剪下来的原已加热封闭两端小管的血液。 2．采用试管法作交叉配血试验，最好不用玻片法。 3．用生理盐水洗涤红细胞去除血浆，预防纤维凝块的形成。 4．配血管中发生溶血现象，表明有抗原抗体反应同时还有补体参与，是配血不合的严重情况，应十分重视。 5．盐水配血试验阴性，但有反复输血史或妊娠史的受血者，应加酶法、抗人球蛋白法等配血。 6．为确保输血的安全，应输同型血。 一、ABO血型鉴定 盐水凝集法 玻片法 试管法 凝胶微柱法 检测红细胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的血型抗体，依据抗原抗体存在的情况判断血型。 常规的方法包括正向定型与反向定型 正向定型※：已知抗体特异性的血清检查红细胞抗原 反向定型※：已知血型红细胞检查血清抗体 血型鉴定原理 ＋表示凝集，－表示无凝集 对抗血清的要求※ ①高度特异，只能与相应的红细胞抗原发生凝集，无非特异性凝集， ②高效价，抗A血清效价在1:128以上，抗B血清效价在1:64以上。 ③高亲和力，15秒内出现凝集，其强度为3分钟时凝块1mm。 ④无冷凝集素。 ⑤无菌。分离血清后56℃，30min灭活。 ABO 血 型 鉴 定 1．生理盐水凝集法 ①ABO血型抗体一般是IgM，属于完全抗体 ②IgM抗体分子链较长，能克服红细胞表面排斥力，同时分子量较大，它能与相应抗原特异性结合，在生理盐水中发生肉眼可见的凝集现象。 ABO 血 型 鉴 定 原理 IgM抗体凝集红细胞示意图 IgM在盐水介质中产生凝集 ①玻片法： 操作简单，不需要离心，适于大规模血型普查。 反应时间长，易忽略较弱的凝集而导致定型错误。不适于反定型。 ABO 血 型 鉴 定 镜检证实 ABO 血 型 鉴 定（玻片法） 抗A血清1滴 抗B血清1滴 加5％