工业微生物菌种选育与保藏.ppt

保存方法：应能较长期地保存原有菌种的优良性能，使菌种稳定，同时也要考虑到方法本身的经济简便。不同的菌种有不同的保存方法，以便长期保藏。酵母菌：定期移植斜面低温保藏法。也可采用石蜡油封保藏法。霉菌：斜面保藏法和沙土管保藏法。细菌和放线菌：一般细菌以采用冷冻干燥保藏法为佳。放线菌可用沙土或冷冻保藏法保藏。短期可采用斜面保藏。保藏应注意的问题：菌体状态：休眠体基质：营养贫乏操作过程：不应对细胞造成伤害第29页，课件共55页，创作于2023年2月工业生产中微生物育种的基本方法包括自然选育、诱变育种、抗性菌种选育、代谢控制育种及基因重组定向育种等。育种就是要改善菌种的特性，使之能提高产量、改进质量、降低成本、改进工艺、方便管理及综合利用等。

代谢控制育种主要有两个方面：改变代谢通路的育种改变代谢自动调节系统的育种第三节菌种的选育第30页，课件共55页，创作于2023年2月一、自然选育采样增殖培养从自然界选育菌株纯种分离性能鉴定从自发突变中选育菌株第31页，课件共55页，创作于2023年2月二、诱变育种按照生产的要求，根据生物的遗传和变异的理论，用人工的方法造成菌种变异，再经过筛选、而达到菌种诱变选育的目的。诱变育种一般采用物理、化学诱变剂使微生物DNA的碱基排列发生变化，以使排列错误的DNA模板形成异常的遗转信息，造成某些蛋白结构变异，而使细胞功能发生改变。

第32页，课件共55页，创作于2023年2月原种（出发菌株）?纯化?斜面培养?完全培养基同步培养?离心洗涤?玻璃珠震荡分散?过滤?单细胞或孢子悬浮液?活菌计数诱变处理?诱变处理预备实验?处理液活菌计数平板分离?形态变异并计算其变异率斜面培养?初筛、复筛?自然分离和再复筛保藏及扩大试验诱变育种第33页，课件共55页，创作于2023年2月出发菌株的选择诱变剂的选择诱变操作及培养突变株的筛选突变高产基因的表现形态突变高产突变耐药性突变营养缺陷型突变结构类似物抗性突变第34页，课件共55页，创作于2023年2月出发菌株（parentstrain）选择应考虑的问题出发菌株的稳定性：选用具备优良特性的菌株：挑选对诱变剂敏感的菌株：注意菌株的生理状态及生长发育时间：野生菌株自发突变后获得的高产菌株已经诱变过的菌株出发菌株第35页，课件共55页，创作于2023年2月考虑试验菌株的遗传背景：各种诱变剂有不同的作用机制，一种诱变剂的作用常主要集中在DNA的某些特异部位上，多次反复用一种诱变因子易出现“饱和”或恢复突变现象，因此诱变时常采用多种不同的诱变因子或复合诱变因子。诱变剂的选择菌悬液的制备单细胞悬浮液：106个/mL孢子悬浮液：108个/mL诱变：预实验确定适宜的诱变条件筛选：选择合适的筛选方法第36页，课件共55页，创作于2023年2月紫外线诱变紫外线是应用最广、研究最多、最经济、诱变效果较理想的诱变剂，紫外线诱变一般采用15W紫外线杀