高效液相色谱-测器.ppt

结构图 接参比电极 和对电极 接色谱柱 塑料块 工作电极 (Pt, Au, 碳糊) Teflon 1 cm 安培检测器 局限：流动相必须含有电解质，且呈化学隋性。只能检测具有电活性的物质。 极谱检测器 库仑检测器 极谱库、仑检测器结构图 化学发光检测器(Chemiluminescence detector， CD) 该检测器是一种新型检测器。 1、特点：快速、灵敏的新型检测，最小检出量可达10-12g/ml, 设备简单、价廉、线性范围宽等。 2、原理与结构：某些物质在常温下进行化学反应，生成处于激发态势反应中间体或反应产物，当它们从激发态返回基态时，就发射出光子。物质激发态的能量是来自化学反应。当分离组分从色谱柱中洗脱出来后，立即与适当的化学发光试剂混合，引起化学反应发光，通过光电倍增管将光信号变成电信号，进行检测。其光强度与该物质的浓度成正比。 　 蒸发光散射检测器 (EvaporativeLight-scatteringDetector , ELSD) 通用型检测器。 1、特点：任何挥发性低于流动相的样品均能被检测。敏度高，对温度变化不敏感，基线稳定，适合与梯度洗脱液相色谱联用。能检测不含发色团的化合物，如：碳水化合物、脂类、聚合物、未衍生脂肪酸和氨基酸、表面活性剂、药物(人参皂苷、黄芪甲苷)，并在没有标准品和化合物结构参数未知的情况下检测未知化合物 。 检测分为三个步骤： （1）用惰性气体雾化洗脱液 （2）流动相在加热管（漂移管）中蒸发 （3）样品颗粒散射光后得到检测。  2、原理及结构： HPLC柱 喷雾气体 蒸发漂移管 激光光源 样品液滴 光二极管检测器 散射室 结构图 ? 示差折光 紫外 荧光 电导 应用范围 通用 选择性 高选择性 选择性 可否梯度淋洗 不可 可 可 不可 线性范围 104 103 104 最小检测量 10-6g 10-9g 10-12g 10-9g 对温度敏感度 敏感 低 敏感 溶剂使用情况 无限制 受限制 受限制 受限制 几种检测器特性比较 105 低 检测器 应用范围 主要特点 紫外-可见光 有紫外吸收的物质；80%的 有机物都可以检测 池体积可制作得很小；检测后不破坏样品，可用于制备 荧光 自身发荧光的物质或荧光衍 生物 易受背景荧光、pH和溶剂的影响；适用于痕量分析。 化学发光 发光试剂受限制；易受流动相组成和脉动的影响。 电导 含卤、硫、氮化合物具有高 选择和高灵敏度 是离子性物质的通用检测器；不能用于有机溶剂体系。 电化学 具有氧化还原活性的或某些 没有氧化还原活性的物质经 过衍生化后也能进行检测 易受流动相pH值和杂质的影响；稳定性较差。 蒸发光散射 任何挥发性低于流动相的样 品均能被检测 可检测所有物质。 示差折光 对所有溶质都有响应 可检测所有物质；不适合微量分析 其它检测器 质谱检测器 激光检测器 红外检测器 柱后反应检测器 介电常数检测器 放射性同位素检测器 离子选择电极检测器 旋光检测器 圆二色谱检测器 等等 高效液相色谱 检 测 器 侯建军 检测器 是高效液相色谱仪的核心部件，他负责把从色谱柱分离出来的各组分快速、准确的检测出来，实现定性、定量分析。 检测器的分类 1、 紫外可见吸收检测器(UV) 2 、光电二极管阵列检测器 ( PDA) 3 、荧光检测器( FD) 4 、示差折光检测器( RID) 5 、电化学检测器( ED) 6 、化学发光检测器( CD) 7 、蒸发光散射检测器(ELSD) 紫外可见吸收检测器 (ultraviolet－visible detector，UV) 紫外可见吸收检测器(UVD)是HPLC中应用最广泛的 检测器，几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。 属于选择性检测器。 1 、特点：灵敏度较高，线性范围宽，噪声低，波长可选，对流动相的流速和温度变化不敏感，适用于梯度洗脱，对强吸收物质检测限可达10-9g/ml以下，检测后不破坏样品，可用于制备，并能与多种检测器串联使用。工作原理与结构同一般分光光度计相似，也就是装有流通池的紫外可见分光光度计。 2、结构与原理：紫外吸收检测器常用氘灯作光源，氘灯则发射出紫外-可见区范围的连续波长，并安装一个光栅型单色器，其波长选择范围宽(190nm～800nm)。 它有两个流通池，一个参比池，一个测量池。光源发出的紫外光照射到流通池上，若两流通池都通过纯的均匀溶剂，则它们在紫外波长下几乎无吸收，光电管上接受到的辐射强度相等，即无信号输出。当组分进入测量池时，吸收一定的紫外光，使两光电管接受到的辐射强度不等，即有信号输出，输出信号大小与组分浓度有关。 可变波长紫外检测器 固定波长紫外检测