实验五 报告基因的显微观察及其在生物学研究中的应用.pdf

报告基因的显微观察及其在生

报告基因的显微观察及其在生

物学研究中的应用

物学研究中的应用

报告基因－reportergene

报告基因－reportergene

编码可被检测的蛋白质或酶的基因,其表达产物容易被鉴

编码可被检测的蛋白质或酶的基因,其表达产物容易被鉴

定；

定；

将它的编码序列和目的基因的表达调控序列或目的基因相

将它的编码序列和目的基因的表达调控序列或目的基因相

融合，转化到生物体中；

融合，转化到生物体中；

通过检测其表达可以研究在生物体内，调控序列的作用方

通过检测其表达可以研究在生物体内，调控序列的作用方

式或目的基因的表达调控。

式或目的基因的表达调控。

哪些基因可用作报告基因？

哪些基因可用作报告基因？

已被克隆和全序列已测定；

已被克隆和全序列已测定；

表达产物在受体细胞中不存在，即无背景，在被转染的细

表达产物在受体细胞中不存在，即无背景，在被转染的细

胞中无相似的内源性表达产物；

胞中无相似的内源性表达产物；

其表达产物容易观察或能进行定量测定

其表达产物容易观察或能进行定量测定

植物中常用的报告基因

植物中常用的报告基因

基因名称基因编码蛋白检测方法

基因名称基因编码蛋白检测方法

催化底物形成β-D-葡萄糖苷

催化底物形成β-D-葡萄糖苷

β-

-D-glucuronidase（β

GUSβ-D-glucuronidase（β-

GUS酸，它在植物体中几乎无背

D-葡萄糖苷酶）酸，它在植物体中几乎无背

D-葡萄糖苷酶）

景，组织化学检测很稳定

景，组织化学检测很稳定

2＋

在有ATP、Mg2＋、O和荧光素

在有ATP、Mg、O和荧光素

2

2

（

Luciferaseluciferin）存在下发出荧光

Luciferase荧光素酶（luciferin）存在下发出荧光

荧光素酶

(化学发光，chemiluminescent）