cw2030一步法快速试剂盒鼠.pdf
版本号
OneStepWesternKitHRP(Mouse)
一步法快速WB(HRP)试剂盒(鼠)
号:CW2030
保存:2-8℃,避免冷冻
组分说明
Cat.No.CW2030CW2030ACW2030B
KitSize10250
封闭液125ml30ml500ml
抗体反应液HRP(鼠)1ml200μl5×1ml
抗体稀释液125ml30ml500ml
漂洗液(10×)125ml30ml500ml
产品简介
一步法快速WB试剂盒(鼠)是康为世纪研发的WesternBlot检测试剂盒,能够在1小时左右得到高质量的
WesternBlot结果,且操作简便、检测灵敏度高、背景低、不需再加入二抗、系统稳定性强。常规的WesternBlot间接
法检测过程(封闭、一抗结合和二抗结合)需要较长的时间,实验流程复杂且需要多步条件优化。胶上的蛋白转移到载体
膜上后,使用试剂盒中的封闭液孵育5min,再用抗体反应液处理后的一抗孵育载体膜,经洗涤三次(每次5分钟)后,
即可进行发光或显色检测。本试剂盒针对目的蛋白一抗为鼠的实验系统使用。
注意事项
1.客户自己准备鼠的一抗。
2.使用封闭液、抗体稀释液(鼠)、漂洗液之前请充分混匀。
3.漂洗液如在2-8℃保存时出现沉淀,请恢复到室温,把沉淀溶解后正常使用,1×漂洗液可在室温保存一个月。
4.建议转膜完成后用丽春红等试剂染色,并把膜上多余部分剪去以增加试剂的使用效率。
5.一抗和抗体反应液HRP(鼠)需要通过预实验来确定最佳的稀释用量。
6.抗体反应液HRP(鼠)、抗体稀释液和抗体用量可根据膜的大小按比例放大或减少。
7.加入一抗的抗体稀释液可以回收重复使用一次。特异性及亲和力不好的抗体建议不重复回收使用。回收后抗体如在1-2
天内使用放置在2-8℃,长期保存请在-20℃冻存,避免多次反复冻融。
8.如果存在较高背景的情况,请调整抗体的用量,并增加洗膜次数。
9.试剂盒内所有试剂请于2-8℃保存,避免冻融。
操作步骤
本产品适用于转膜完成后的封闭及抗体孵育步骤,以5cm×8cm膜为例:
1.漂洗液准备:取10ml10×漂洗液用蒸馏水稀释至100ml,待用。每次洗膜用8-10ml。
2.转膜完成后,将膜浸没到10ml封闭液中,室温封闭5分钟。
3.倒掉封闭液,加入8-10ml1×漂洗液,于摇用较大速度漂洗1分钟。