DB13_T1384.9-2011_饲料中伊维菌素的测定_河北省.docx
ICS65.120
DB13
B46
河北省地方标准
DB13/T1384.9—2011
饲料中伊维菌素的测定
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河北省质量技术监督局发布
DB13/T1384.9—2011
前言
本标准按照GB/T1.1－2009给出的规则起草。
本标准由河北省质量技术监督局提出。
本标准起草单位：河北省食品质量监督检验研究院、石家庄市疾病预防控制中心、河北医科大学、
北京出入境检验检疫技术中心、河北省饲料产品质量监督检验站。
本标准主要起草人：张岩、张宏、李挥、丛斌、卢晓宇、吕品、杨立学、李志平、贾茜、马春玲、
米振杰、张敬轩、沈磊、高振同、武英利。
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DB13/T1384.9—2011
饲料中伊维菌素的测定
1范围
本标准规定了饲料中伊维菌素的液相色谱-串联质谱测定方法。
本标准适用于饲料中伊维菌素的测定。
本标准的方法检出限为10μg/kg。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（GB/T6682－1992，neqISO3696:1987)
3原理
试样中的伊维菌素，采用丙酮-水提取。提取液经用异辛烷进行液-液分配使被测物进入异辛烷层。
浓缩，用正己烷与乙腈浸出，并进行第二次液-液分配使被测物进入乙腈层。浓缩，加水，使成水溶液。
水溶液再经Sep－Pak小柱净化，用乙腈洗脱。洗脱液经蒸干，甲醇浸出并定容，溶液经液相色谱-串联
质谱定性定量检测。
丙酮：经高锰酸钾回流lh，重蒸馏。
4.10伊维菌素标准储备液：准确称取0.1g（准确至0.000lg）的伊维菌素标准品于100mL
容量瓶中，用少量的甲醇溶解，然后再用甲醇稀释至刻度，混匀。配制成伊维菌素浓度为1.0mg/mL
的标准储备液。
4.11伊维菌素标准工作液：根据需要，准确移取适量标准储备液，用甲醇稀释成适当浓度的标准
工作液，标准工作液需每周配制一次。
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DB13/T1384.9—2011
4.130.1％甲酸水溶液：准确量取1mL甲酸至1000mL容量瓶中，用水定容，混匀即可。
5仪器和设备
5.1液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源。
5.2电子天平：感量精确至0.01g。
5.3离心管：50mL。
5.4
5.5
5.6
5.7
离心机。
旋转蒸发器。
超声波浴。
旋涡混匀器。
6测定步骤
6.1提取
称取约5g（精确至0.0lg）试样于烧杯中，加入10mL丙酮-水（1+1），旋涡混匀2min。移至
50mL离心管中，用20mL异辛烷洗涤烧杯，合并入离心管中。旋涡混匀1min，于5000r/min离心
10min，取异辛烷层氮吹至2mL。
6.2净化
取上述浓缩液加入8mL正己烷和10mL乙腈，于超声波浴中超声振摇5min。移至50mL离心管
中，于5000r/min离心5min。移乙腈层于50mL离心管中。再用10mL乙腈提取一次，离心5min，
合并乙腈层。加入20mL水，于60℃旋转蒸发浓缩至约6mL，加入6mL水。
取上述溶液缓慢注入经预处理过的C18Sep－Pak小柱中，弃去流出液，减压干燥。用3×5mL乙腈
洗脱，收集洗脱液于具塞刻度离心管中。氮气吹干，用1.0mL甲醇－乙腈－水溶液（9+9+2）溶解，
待测。
2
DB13/T1384.9—2011
表1
梯度洗脱程序
时间（min）
0
A（％）
B（％）
60
60
90
95
10
10
60
60
40
40
10
5
1.00
2.00
11.00
11.10
12.50
12.60
15.00
90
90
40
60
6.3.2色谱测定
根据试样中被测样液的含量情况，选取响应值相近的标准工作液进行色谱分析。标准工作液和样液
中待测物的响应值均应在仪器线性响应范围内。伊维菌素标准品多反应监测（MRM）色谱图见附录A。
6.4定性、定量
按照液相色谱-串联质谱条件测定样品和标准工作溶液，如果检测的质量色谱峰保留时间与标准品
一致，定量测定时采用标准曲线法。定性时应当与浓度相当标准工作溶液的相对丰度一致，相对丰度允
许偏差不超过表2规定的范围，则可判断样品中存在对应的被测物