DB13_T1384.6-2011_饲料中泰乐菌素的测定_河北省.docx
ICS65.120
DB13
B46
河北省地方标准
DB13/T1384.6—2011
饲料中泰乐菌素的测定
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河北省质量技术监督局
发布
DB13/T1384.6—2011
前言
本标准按照GB/T1.1－2009给出的规则起草。
本标准由河北省质量技术监督局提出。
本标准起草单位：河北省食品质量监督检验研究院、石家庄市疾病预防控制中心、北京出入境检验
检疫技术中心、河北医科大学、河北省饲料产品质量监督检验站。
本标准主要起草人：张岩、张宏、李挥、丛斌、杨立学、卢晓宇、吕品、贾茜、李志平、马春玲、
米振杰、沈磊、范斌、高振同、武英利。
I
DB13/T1384.6—2011
饲料中泰乐菌素的测定
1范围
本标准规定了饲料中泰乐菌素的液相色谱-串联质谱测定方法。
本标准适用于饲料中泰乐菌素的测定。
本标准的方法检出限为1.0μg/kg。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（GB/T6682-1992，neqISO3696:1987)
3原理
试样用碱性溶液溶解后，用固相萃取柱萃取，洗脱液浓缩后用甲醇溶液定容，液相色谱-串联质谱
仪测定，外标法定量。
4.8泰乐菌素标准储备溶液：1.0mg/mL。准确称取适量的泰乐菌素标准物质（4.7），用甲醇配成
1.0mg/mL的标准储备液。储备液贮存在4℃冰箱中，可使用两个月。
4.9泰乐菌素标准工作溶液：用空白样品提取液分别配成泰乐菌素浓度为2.0ng/mL、5.0ng/mL、
10.0ng/mL、50.0ng/mL、100.0ng/mL、200.0ng/mL标准工作溶液。标准工作溶液在4℃保存，可
使用一周。
乙酸钠缓冲液（pH＝5.5，0.15mol/L）：称取12.30g醋酸钠于1000mL量瓶中，加900mL
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DB13/T1384.6—2011
5.1液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源。
5.2分析天平：感量0.lmg和0.0lg各一台。
5.3氮吹仪。
5.4旋涡混匀器。
5.5
离心管：100mL。
5.6高速离心机。
5.7滤膜过滤器：0.45μm，有机相。
5.8刻度离心管：10mL。
6试样的制备
6.1提取
准确称取5g样品（精确至0.01g）于100mL离心管中，加入30mL二氯甲烷于旋涡混匀器上快
速混匀10mim,5000r/min离心5min。将上清液移至20mL试管中，氮吹仪吹至近干，加1mL甲醇
溶解残渣，再加入乙酸钠缓冲溶液4mL,轻轻摇匀，在离心管中加入5mL正己烷，轻轻摇匀，于5000
r/min离心5min,使分层，取水相待净化。
6.2净化
将水相移入OasisHLB柱器（使用前分别用3mL甲醇和5mL水预处理，保持柱体湿润）中，以不
高于2mL/min的流速过柱，待溶液完全流出后，用5mL水洗离心管和贮液管并过柱,然后再用5mL
甲醇＋水（20＋80）洗柱，弃去全部淋出液。在65kPa的负压下，减压抽干10min，最后用5mL甲
醇洗脱，收集洗脱液于10mL刻度离心管中，于50℃氮吹仪吹干，用甲醇＋水（30＋70）定容至1.0mL，
过0.45μm的滤膜到进样瓶中，供液相色谱－质谱仪测定。
7.1测定
流动相：水（A）+甲醇（B）。
雾化气、鞘气为高纯氮气，碰撞气为高纯氦气。
电喷雾电压、碰撞电压等自动优化至最佳值。
定性离子对(m/z)：916.5/174，916.5/772.5。
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DB13/T1384.6—2011
定量离子对(m/z)：916.5/174。
7.2液相色谱－串联质谱测定
泰乐菌素标准工作溶液在液相色谱-串联质谱设定条件下分别进样，以样品峰面积为纵坐标，工作
溶液浓度（ng/mL）为横坐标，绘制6点标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量，样品溶液中
泰乐菌素的响应值均应在仪器测定的线性范围内。泰乐菌素标准物质质谱图参见附录A。
7.3空白试验
除不称取试样外，均按上述步骤进行。
8结果计算
结果用色谱数据处理机或按式(1)计算，计算结果需扣除空白值：
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