异源宿主中蛋白质内含子剪接活性的定向进化的开题报告.docx

异源宿主中蛋白质内含子剪接活性的定向进化的开题报告 一、研究背景和意义 剪接（splicing）是真核生物基因表达过程中的关键环节。在基因转录过程中，RNA聚合酶沿着DNA模板合成RNA分子，RNA分子由编码外显子和非编码内含子组成。在剪接过程中，内含子将被剪除，仅保留编码外显子，形成成熟的mRNA。这种剪接方式是多样化的，往往影响到蛋白质的功能和表达水平。内含子剪接的失调已被发现与包括癌症、糖尿病和阿尔兹海默症等多种疾病的关系。 异源宿主中的蛋白质内含子剪接活性的定向进化，是指利用定向进化的策略，通过构建突变库，进一步筛选具有内含子剪接调控能力的蛋白质。对于基因治疗等领域，有效地提高了目标基因的表达，为疾病治疗和相关领域提供了更广泛的选择。 二、研究内容和方法 设计和构建含有内含子序列的克隆基因，将克隆基因插入到宿主细胞中。基于流式细胞分选技术，分选出含有特定内含子剪接变异的细胞。同时，通过定向进化的策略，不断优化蛋白库，筛选出具有更好内含子剪接调控能力的蛋白质。 三、研究预期结果 通过本研究的方法，可以筛选出具有更好内含子剪接调控能力的蛋白质，为基因治疗等领域提供更多选择。此外，本研究也可对剪接作用机制研究提供新的思路和方法。