北京农林科学院赴英国科技培训与学术交流总结报告.PDF

北京市农林科学院赴英国科技培训与学术交流总结报告 受英国约翰英纳斯中心(John Innes Centre)的Cathie Martin 教授邀请，花卉 研究室金万梅研究员于2017 年 11 月13 日至2018 年2 月10 日，赴英国约翰英 纳斯中心执行国家外专局培训项目，主要开展科技培训和学术交流。 一、团组基本情况 出访团组名称：北京市农林科学院赴英国团组 出访人员姓名：金万梅 出访国家：英国 邀请单位：英国约翰英纳斯中心 出访时间： 2017 年11 月13 日 - 2018 年2 月10 日（共90 天） 二、出访的主要任务 本次出访任务是执行2017 年国家外国专家局批准赴英国开展专业技术培训 项目“月季杂交育种技术提升”（P172001033 ）。欧洲是月季育种的传统强国，选 择英国培训，可以在短期内，有效提升科研人员月季育种技术的能力，为科研人 员回国后，结合中国国情，开展月季育种提供了技术支撑。英国约翰英纳斯中心 是一家世界知名，学术水平一流的研究机构，本次主要开展的专业技术培训内容 如下：开展Golden gate 载体构建技术、基因编辑技术、CPMV Hyper-trans 过表 达技术、HPLC 等专业技术培训、杂交种子突变体的筛选等，参与植物色素等次 生代谢途径的构建；考察英国月季（蔷薇）资源等。 三、出访的主要收获 1. 多次与Cathie Martin 教授及课题组成员进行了学术交流 Cathie Martin 教授是国际上著名的植物学家，她的研究兴趣在于利用植物科 学改善人类饮食和健康，特别是利用植物次生代谢工程提高食品的营养价值，尤 其以番茄为研究材料，在植物色素如花青素、类胡萝卜素、番茄红素等方面、植 物天然活性物质如酚类物质方面、植物特化细胞的调控等方面获得突破性进展， 在国际知名期刊 nature biotechnology 、nature communication 、plant cell 、plant physiology 、plant journal 等期刊发表论文100 多篇。2017 年12 月5 日，金万梅 在Cathie Martin 课题组组会上介绍了花卉研究室在MYB 调控果实颜色的方面的 研究进展，主要包括“ The R2R3 MYB transcription factor PavMYB10.1 involves in anthocyanin biosynthesis and determines fruit skin colour in sweet cherry ”和“MYB family genes have combinatorial effects on the red color in strawberry (Fragaria × ananassa) fruits ”，大家充分讨论并提了很多有用的意见和建议。 也积极参加聆听约翰英纳斯中心的各类学术报告（图 1），为我们自己的科 研储备了学术方法和思想，收获很大。 图1 参加学术报告 2. 顺利完成了 Golden gate 植物表达载体构建技术、基因编辑技术、CPMV Hyper-trans 过表达技术、HPLC 等专业技术培训 2017 年11 月20 日到2017 年12 月7 日，主要开展Golden gate 植物表达载 体构建技术培训（图 2 ），经典酶切法是逐级采用多步酶切反应将多个目标基因 构建在载体上；而golden gate 克隆技术则是实现在同一个反应里利用IIS 限制型 内切酶和连接酶将多个基因片段按照设计的顺序依次进行连接，实现多基因片段 一次无缝连接。IIS 限制型内切酶能够识别双链DNA 的靶位点，并对靶位点下 游的DNA 进行切割，产生粘性末端，并且对多个既定顺序的粘性片段进行连接。 从引物设计开始，提取番茄果实 RNA 、反转录为 cDNA、克隆基因、克隆启动 子、连接到目标载体上、测序目标基因、转化大肠杆菌和根癌农杆菌，完成Golden gate 载体构建技术的培训。 该方法应该注意以下：自连问题，由于是粘性末端的片段，有一定的自连率， 通过鉴定排除；选择合适的缓冲液进行反应；片段不宜太大，否则会影响基因的 表达。 图2 在英国约翰英纳斯中心开展专业技术培训 2017 年