第1节重组DNA技术的基本工具导学案.docx

第1节重组DNA技术的基本工具

【学习目标】

1.阐明DNA重组技术所需的三种基本工具的作用

2．进行DNA的粗提取与鉴定

3.关注基因工程的社会议题，参与讨论基础理论和技术发展如何催生基因工程。

【重点难点】

DNA重组技术所需的三种基本工具的作用及DNA的粗提取与鉴定

一、基因工程的概念

基因工程是指按照人们的愿望，通过等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在水平上进行设计和施工的，因此又叫作技术。

二、DNA重组技术的基本工具

1．“分子手术刀”—

(1)来源：主要来自。

(2)功能：能够识别双链DNA分子的特定，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的断开。

(3)限制酶的切割产物：产生或。

当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA分子的两条链分别切开时，产生的是；当限制酶在它识别序列的中心轴线处将DNA分子的两条链分别切开时，产生的是。

2．“分子缝合针”—

(1)作用：将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的。

(2)种类[填表]

种类

比较

E.coliDNA连接酶

T4DNA连接酶

来源

特点

只能连接

既可以连接黏性末端，又可以连接

3.“分子运输车”——

(1)载体——质粒

①质粒的本质：是一种裸露的、结构简单，独立于或之外，并具有能力的环状双链DNA分子。

②质粒适于作基因运载体的特点和条件

Ⅰ.质粒分子上有一个至多个位点，供外源DNA片段（基因）插入其中。

Ⅱ.携带外源DNA片段的质粒进入受体细胞后，能在细胞中，或上，随同步复制。

Ⅲ.人工改造的质粒常带有，如：、_____等，便于。

(2)载体——噬菌体、动植物病毒等。

四、DNA的粗提取与鉴定

1．实验原理

(1)不溶于酒精，溶于酒精。

(2)DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，它能溶于溶液。

(3)在一定温度下，DNA遇试剂会呈现蓝色。

2．实验步骤

(1)研磨：取30g洋葱切碎，倒入10ml研磨。

(2)除杂：漏斗中垫上纱布过滤后，在4℃冰箱静置后取。或直接在1500r/min的转速下离心后取。

(3)提取：加入体积相等、体积分数为95%的酒精，溶液出现白色的丝状物是。

方法一：用玻璃杯按方向搅拌，卷起丝状物，用滤纸吸去上面的水分。

方法二：10000r/min的转速下离心5min，取晾干。

(4)鉴定：

项目

A

B

2mol/L的NaCl溶液5mL

丝状物或沉淀物

不加

加入

__________试剂4mL

沸水中加热5min

现象

__________

__________

3.1重组DNA技术的基本工具答案

转基因DNA分子重组DNA

1.限制性内切核酸酶(又称限制酶)原核生物核苷酸序列磷酸二酯键

黏性末端平末端黏性末端平末端黏性末端平末端

2.DNA连接酶磷酸二酯键大肠杆菌T4噬菌体黏性末端平末端

3.基因进入受体细胞的载体真核细胞的细胞核原核细胞拟核DNA自我复制

限制酶切割进行自我复制整合到受体DNA受体细胞DNA标记基因四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因重组DNA分子的筛选

1.DNA某些蛋白质2mol/L的NaCl二苯胺

2.研磨液上清液上清液DNA一个