生物医药实验操作考核题.docx
生物医药实验操作考核题
姓名_________________________地址_______________________________学号______________________
密封线
1.请首先在试卷的标封处填写您的姓名，身份证号和地址名称。
2.请仔细阅读各种题目，在规定的位置填写您的答案。
一、选择题
1.生物医药实验中，以下哪种方法是用于分离DNA和蛋白质？
A.盐析
B.离心
C.沉淀
D.电泳
2.以下哪种物质用于质粒的提取？
A.琼脂糖凝胶
B.生理盐水
C.异丙醇
D.NaOH
3.PCR实验中，哪个步骤是用于扩增目标DNA序列？
A.变性
B.退火
C.合成
D.解旋
4.以下哪种仪器常用于观察细胞形态？
A.显微镜
B.紫外分光光度计
C.荧光定量PCR仪
D.生物质能谱仪
5.以下哪种方法是用于检测细胞内蛋白质表达？
A.Westernblot
B.免疫荧光
C.RTPCR
D.Southernblot
答案及解题思路：
1.答案：D.电泳
解题思路：电泳是利用带电粒子在电场中移动的速度差异，将混合物中的不同分子按大小或电荷分离。在生物医药实验中，电泳常用于分离DNA和蛋白质，因为DNA和蛋白质在电场中的迁移速度不同。
2.答案：C.异丙醇
解题思路：质粒提取过程中，异丙醇常用于沉淀质粒DNA。当加入异丙醇后，质粒DNA由于疏水性而沉淀，便于后续的纯化步骤。
3.答案：B.退火
解题思路：PCR（聚合酶链反应）中，退火步骤是指将双链DNA模板加热至一定温度，使双链解开，为后续的DNA合成提供单链模板。因此，退火步骤是用于扩增目标DNA序列的关键步骤。
4.答案：A.显微镜
解题思路：显微镜是观察细胞形态的常用仪器。通过放大细胞图像，研究人员可以详细观察细胞的形态、结构及其内部结构。
5.答案：A.Westernblot
解题思路：Westernblot是一种检测细胞内蛋白质表达的方法。通过特异性抗体与目标蛋白质结合，然后在电泳分离后，利用二抗与一抗结合，通过化学发光或荧光检测系统检测蛋白质的表达水平。
二、填空题
1.生物医药实验中，常用的核酸提取方法是__________________。
答案：酚氯仿法
解题思路：酚氯仿法是核酸提取中常用的方法，通过使用酚和氯仿将细胞中的蛋白质和DNA分离，再通过离心和洗涤得到纯化的DNA。
2.PCR实验中，变性、退火、合成的温度分别是__________________。
答案：变性9498℃，退火5065℃，合成7075℃
解题思路：PCR（聚合酶链反应）中，变性阶段需要高温使双链DNA解链，退火阶段需要适当温度使引物与模板DNA结合，合成阶段需要温度适宜以进行DNA的合成。
3.Westernblot实验中，转移膜常用的缓冲液是__________________。
答案：转移缓冲液
解题思路：Westernblot实验中，转移膜常用的缓冲液含有Tris、甘氨酸和甲醇等成分，用于促进蛋白质从凝胶转移到硝酸纤维素膜上。
4.细胞培养实验中，__________________用于消毒细胞培养器皿。
答案：高压蒸汽灭菌法
解题思路：高压蒸汽灭菌法是细胞培养实验中用于消毒器皿的标准方法，通过高温高压杀灭可能存在的微生物。
5.ELISA实验中，洗涤液常用的成分是__________________。
答案：磷酸盐缓冲溶液（PBS）
解题思路：ELISA实验中的洗涤液通常使用磷酸盐缓冲溶液，这是因为PBS能提供适当的pH环境，同时有助于清洗去除未结合的酶标记物。
三、判断题
1.PCR实验中，变性、退火、合成的温度是固定的。
答案：错误
解题思路：在PCR实验中，变性、退火和合成的温度并非固定。这三个步骤的温度根据所使用的引物、DNA模板的长度和类型、以及扩增目的等不同因素而有所不同。通常，变性温度设置在9598℃之间，退火温度根据引物与模板的结合特性和Tm值设定，合成温度一般在6072℃之间。
2.紫外分光光度计可以用于测定DNA的浓度。
答案：正确
解题思路：紫外分光光度计可以用于测定DNA的浓度。通过测定在特定波长（通常为260nm）下的吸光度，根据BeerLambert定律计算出DNA的浓度。这种方法简便、快速，是实验室常用的DNA定量方法。
3.Westernblot实验中，一抗和二抗都是特异性的。
答案：正确
解题思路：Westernblot实验中，一抗和二抗都是特异性的。一抗通常针对目的蛋白的特异性抗原表位，二抗则与一抗结合，通常使用酶标二抗，以便于后续的显色反应。特异性结合是保证实验结果准确性的关键。
4.细胞培养实验中，