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实验 ABO血型鉴定  效价测定 亲和力实验 一、ABO血型鉴定 ABO血型抗体系IgM型，分子大，能在生理盐水介质中与相应的抗原结合而发生凝集反应。做ABO血型鉴定时，应该以标准抗体鉴定红细胞上的抗原，同时以标准红细胞鉴定血清中的抗体，两者符合才能做出正确判断。 （一）正定型 用已知IgM类特异性血型抗体与被检测红细胞在盐水介质中反应，若出现凝集现象，表明被检测红细胞膜上有相应抗原，从而判断血型。 采集静脉血 制备5%的被检测红细胞生理盐水悬液 玻片法 试管法 观察结果，有无凝集或者溶血（显微镜） （二）反定型 用已知的标准A、B、O型红细胞与被检测血清反应，若被检测血清与已知型别的标准红细胞出现凝集，则证明被测定红血清中存在与该红细胞抗原相对应的抗体，反之则没有。 分离血清 分别加5%的三种标准红细胞生理盐水悬液1d，观察有无凝集或者溶血（显微镜）。 严格标记，防止混淆。 观察时，应该先肉眼观察，不确定则用显微镜低倍镜观察有无凝集。 防止出现冷凝集或者某些疾病干扰引起的假凝集。 二、血型抗体效价测定 效价是指血清中含某种抗体的浓度，将被检测抗血清做倍比稀释后，加入一定量的抗原红细胞，观察凝集程度，以最大稀释倍数能与相应红细胞抗原发生凝集的试管稀释倍数之倒数定为效价。 10支小试管，每管加0.1ml生理盐水，再第1管中加入0.1ml血清，混匀后吸取0.1ml到第2管，以此类推，做倍比稀释。稀释倍数为1：2，1：4，1：8等。 加相应的2%的红细胞生理盐水悬液0.1ml，混匀，最终稀释倍数为1：4，1；8，1；16等等。15min后离心后观察结果，先观察上层有无溶血，再轻轻浑匀观察。 以出现凝集的最高稀释倍数的倒数定为该抗体效价。 一般抗A、抗B效价在1：128以上。 三、亲和力实验 亲和力是指血清中的抗体与相应红细胞抗原发生凝集的速度和强度。 被检测血清0.05ml 于玻片上，再吸取10%相应红细胞生理盐水悬液0.1ml 于被测定血清的近旁，用玻片混合血清和红细胞，立即看表，并缓缓转动玻片，要求15s内出现凝集，3min 凝快大小不小于1mm2。 * * AB + + O - - B + - A - + 血型 抗B 抗A - - - - O型红细胞 AB - - O + + B - + A + - 血型 B型红细胞 A型红细胞 *