人(Human)尿素( urea)ELISA试剂盒说明书.pdf
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取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存
于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断 自备物品
人 (Human)尿素 (Urea)ELISA检测试剂盒 1. 酶标仪 (450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
使用说明书
3. 37℃恒温箱
检测原理
操作注意事项
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验 (ELISA)。往
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的
预先包被尿素 (Urea)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、
浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解
HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在
后再使用。
过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封 (低温干燥)保
色。颜色的深浅和样品中的尿素(Urea)呈正相关。用酶标仪在450nm
存。
波长下测定吸光度 (OD 值),计算样品浓度。
3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明
样品收集、处理及保存方法
书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟
上海笃玛生物科技有限公司
试剂盒组成 2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μ
名称 96孔配置 48孔配置 备注 L;
微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条 无
标准品 0.3mL*6管 0.3mL*6管 无 3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀
样本稀释液 6mL 3mL 无 释5倍);空白孔不加。
检测抗体-HRP 10mL 5mL 无
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶
20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释
底物A
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