专题一基因工程.ppt

* 基因工程 专题一 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过 和 技术，赋予生物以 ，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在 上进行设计和施工的，又叫做 。 体外DNA重组 转基因 新的遗传特性 DNA分子水平 DNA重组技术 1.“分子手术刀”—— 。 （1）来源：主要是从 中分离纯化出来的。 （2）功能：能够识别双链DNA分子的某种 的核苷酸序列，并且使每一条链中 部位的两个核苷酸之间的 断开，因此具有 性。 （3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式： 和 。 （一）基因工程的基本工具 限制性核酸内切酶（限制酶） 原核生物 特定 特定 磷酸二酯键 专一 黏性末端 平末端 2.“分子缝合针”—— 。 (1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较： ①相同点：都缝合 键。 ②区别：E·coliDNA连接酶来源于 ，只能将双链DNA片段互补的 之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合 ，但连接平末端的之间的效率较 。 (2)与DNA聚合酶作用的异同: DNA聚合酶只能将 加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接 的末端，形成磷酸二酯键。 DNA连接酶 磷酸二酯 大肠杆菌 黏性末端 两种末端 低 单个核苷酸 两个DNA片段 3.“分子运输车”—— 。 能在受体细胞中复制并稳定保存 具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入 具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择 载体 载体具备的条件：① 。 ② 。 ③ 。 （2）最常用的载体是--- ，它是一种裸露的、结构简单的、独立于 ，并具有 的双链 DNA分子。 （3）其它载体： 。 质粒 细菌染色体之外 自我复制能力 环状 噬菌体的衍生物、动植物病毒 第一步： 。 1.目的基因是指： 。 2.原核基因采取 获得，真核基因是 。人工合成目的基因的常用方法有 和 。 目的基因的获取 编码蛋白质的结构基因 直接分离 人工合成 反转录法 化学合成法 (二)基因工程的基本操作程序 3.PCR技术扩增目的基因 （1）原理： 。 （2）过程：第一步：加热至90～95℃ ； 第二步：冷却到55～60℃， ； 第三步：加热至70～75℃， 。 DN