(发酵室)发酵系统操作规程和注意事项.doc

GRJD-100D发酵系统详细操作规程 第一步：准备工作 1．取出pH、Do探头，装上堵头，打开夹套排污阀(PWFl、PⅣF3)和排空阀 (PKF4、PKF8)，将夹套内水排净，避免空消时夹套水因高温而膨胀产生高压，损坏罐体，同时也可以节省能源，缩短消毒时间； 2．打开控制柜电源，将PLC置于暂停状态，并设定好各参数值； 3．开启蒸汽发生器(详见蒸汽发生器操作流程)，使蒸汽压力保持在0．3Mpa左右；开启空气压缩机，使压力保持在0．4—0．7Mpa之间； 4．将需要补加的料放入补料瓶，装上硅胶管和呼吸器后放入灭菌锅中消毒并自然冷却待用； 5．开pH、Do仪表电源，接上pH、Do探头及电缆，按照pH、Do说明书分别对pH、Do探头进行校正。 第二步：过滤器消毒 1．由于空气减压阀不能消毒，因此消毒前应关闭通向空气减压阀的阀门(KQFl)； 2．打开蒸汽发生器出汽阀向外供汽，微开KQF5，使蒸汽通过蒸汽过滤器净化后对空气过滤器进行消毒。消毒过程中，所有的排空阀都应微微开启，保持蒸汽在整个管路中处于流通状态，排除冷凝水，消除灭菌死角。 3．空气管路部分消毒20—30分钟后，关闭蒸汽阀、同时打开进气阀，用空气将过滤器和管路吹干，约20—30分钟后，关闭排空阀。 注意：过滤器消完毒后，应一直保持有压状态，切勿失压，否则过滤器需重新消毒。 第三步：种子罐罐体空消 1．打开与罐体内筒体相连的蒸汽阀门，对罐体进行空消。 2．当罐温升至121℃左右后，调节蒸汽进汽阀和罐盖上的排空阀，使罐压保持在0.11Mpa左右、罐温保持在121℃左右。 3．保持罐温在121℃约30分钟后(保持时间和温度可以根据不同的培养基做些相应调整)，关闭所有蒸汽阀进汽阀、排空阀，打开出料阀门，将罐内冷凝水排净后，打开罐顶排汽阀，将罐压将到0。 第四步：种子罐实消 1．按照工艺要求，将充分溶解好的培养基从加料口放入罐内。 2．为了减少罐内的冷凝水，先让蒸汽从夹套对发酵液进行预热；开启电机使罐内温度混合均匀(此时PLC上的冷却“手/自动”应置于手动关位置)。 3．当罐温升至105℃左右时，关闭ZQF4，然后再将蒸汽直接通入发酵罐进行加热。 4．调节进、排汽阀，使罐压保持在0.11Mpa左右、罐温保持在121℃左右，约30分钟后，依次关闭所有蒸汽阀，保持罐压在0．1Mpa左右： 5．关闭PWFl，将PLC上的冷却和加热“手／自动”置于自动状态，此时温度等参数将按照设定值进行自动控制，冷却电磁阀自动打开，自来水通过夹套对发酵液进行快速冷却，直至所需温度。 注意：在冷却过程中，罐内热空气会迅速冷却，罐压会急剧下降，此时应密切注意压力表的压力变化，调节进气阀，保持罐压稳定在0.05MPa左右。 第五步：接种、培养 1.火焰封口接种。 2.压差接种。 第六步：种子罐取样 1．打开蒸汽发生器，使蒸汽达到0.3Mpa。 2．依次打开蒸汽发生器排汽阀、ZQF5、QYFl，先对取样口进行消毒，约5-10分钟左右。 3．依次关闭QYF1、ZQF5。 4．依次打开CLFl、QYF1，放掉前面部分料液后，用取样试管取样即可。 第七步：发酵罐罐体空消(与种子罐基本相同) 1．打开与罐体内筒体相连的蒸汽阀门，对罐体进行空消。 2．当罐温升至121℃左右后，调节蒸汽进汽阀和罐盖上的排空阀，使罐压保持在0.11Mpa左右、罐温保持在121℃左右。 3．保持罐温在12l℃约30分钟后(保持时间和温度可以根据不同的培养基做些相应调整)，关闭所有蒸汽阀进汽阀、排空阀，打开出料阀门：将罐内冷凝水排净后，打开罐顶排汽阀，将罐压将到0。 第八步：发酵罐罐体实消(与种子罐基本相同) l. 按照工艺要求，将配好的培养基从加料口放入罐内(应考虑实消时蒸汽的冷凝水和种子量)。 2．为了减少罐内的冷凝水，先让蒸汽从夹套对发酵液进行预热；开启电机使罐内温度混合均匀。 3．当罐温升至105℃左右时，关闭ZQF8，然后再将蒸汽直接通入发酵罐进行加热。 4.调节进、排汽阀，使罐压保持在0.11Mpa左右、罐温保持在121℃左右，约30分钟后，依次关闭所有蒸汽阀，保持罐压在0.1Mpa左右。 5．关闭PWF3，将控制柜上PLC上的冷却“手／自动”开关置于自动的位置，此时温度等参数将按照设定值进行自动控制，冷却电磁阀自动打开，自来水通过夹套对发酵液进行快速冷却，直至所需温度。 注意：在冷却过程中，罐内热空气会迅速冷却，罐压会急剧下降，此时应密切注意压力表的压力变化，调节进气阀，保持罐压稳定在0.05MPA左右。 第九步：移种 当种子罐菌种培养达到预期要求后，即可通过移种罐移入发酵罐进行培养，具体操作如下： 1．对移种管进行消毒。 2．移完种后，对移种口进