（精）Rho激酶研究最新进展.ppt

Rho激酶及其抑制剂临床研究进展 Ras蛋白 癌基因 1976年从劳斯肉瘤病毒中分离得到了第一个能使细胞癌变的基因（取肉瘤sarcoma的缩写，sac基因），人们称这种基因为癌基因（oncogenes） Ras 人类的第一个癌基因是1982年美国科学家从人膀胱癌细胞中找到的，因为它和先前已经获得的鼠肉瘤病毒的癌基因完全相同，故命名为ras基因（取鼠肉瘤rat sarcoma的缩写，ras基因）。 Rho蛋白 属于Ras超家族，Ras homologous的缩写 小的GTP酶，两种存在形态Rho-GDP Rho-GTP Rho基因的发现 1985年，Madaule 及Axel报道了一个新的ras基因成员rho基因，与经典的ras基因（N-, K-及H-ras）具有某些相同的特性。 Rho基因首先从Aplysia（雨虎）的腹腔神经节cDNA文库分离出来，编码的蛋白质中35％的氨基酸与H-ras同源。rho进化中高度保守的区域在果蝇、大鼠、人等均可发现。序列分析显示，人与果蝇的rho基因85％同源。 Rho家族成员及其底物 Rho家族成员 RhoA 、RhoB、 RhoC、 Cdc42 、TC10、 TCL、 Chp、 Wrch-1、 Rac1、 Rac2 、Rac3、 RhoG、 Rac1b、 Rnd1 、Rnd2、 Rnd3/RhoE、 RhoD 、Rif 、RhoH/TTF RhoB、TB1、 RhoBTB2 、Miro-1 底物（效应因子） ROCKI 、ROCK II、 mDia 、PRK1/2 PKN、 Rhoteckin、 Rhophillin、 Kinectin 、Citron Kinase、 MBS 、p76RBE、 PKC epsilon、 DBl transcription factor ROK（Rho-kinase）及其分布 ROK α （或ROCK II ,Rho-associated coiled-coil-containing protein kinase II） 及ROK β （ROCK I）结构十分相似，分子量均为160kDa。在哺乳动物的大多数组织内均有表达，一般以无活性形态存在于胞浆内，在激活后转移到胞膜处起作用。 ROCKI及ROCKII氨基酸序列65％相同，激酶区相似性92％。 含高度保守的富含半胱氨酸/组氨酸区域，与RhoA, RhoB及 RhoC结合，Rho结合区包含30AAs。 ROCK II主要在脑内表达，而ROCK I主要在非神经元组织表达，包括心脏、肺、骨骼肌等。 Rho－ROK信号通路功能 主要调节细胞骨架蛋白合成和降解、移动、收缩等 参予细胞的基本生命过程 细胞迁移 细胞增殖 细胞存活 Rho激酶活化的病理过程 Rho激酶研究进展 Rho激酶抑制剂 国际上已经用于临床应用的Rho激酶抑制剂，有盐酸法舒地尔（fasudil hydrochloifde，FH，又名 HA1077,AT877） 国内产品已经2004年上市，商品名： 另有两种化合物处于研究中：Y-27632和H-1152P 不同的Rho激酶抑制剂的对各种激酶的抑制情况〔IC50 (μM)〕 神经血管单元和多靶点治疗 2002年美国神经疾病和脑卒中研究院在对“脑卒中进展回顾的报告”中明确提出了“神经血管单元（neurovascular unit， NVU）”概念，并于2004年又进一步补充 脑卒中后可导致NVU功能异常，NVU功能异常可进一步导致脑卒中后脑损害的进展；要求在细胞、分子和基因水平研究NVU功能及机制。 Rho激酶在神经血管单元中的作用 Rho激酶作用于肌动蛋白骨架系统引起轴突生长锥回缩及塌陷, 从而抑制轴突生长。 决定轴突、树突生长及相互构成联系的重要信号蛋白,对神经发育和重塑起重要作用。 Rho 激酶信号通路异常可影响神经网络形成。 Rho 激酶与脑卒中（Stroke） 啮齿类动物研究显示：ROK抑制剂对急性期多发性脑梗死动物模型及NMDA兴奋毒性模型具有神经保护作用。 神经复性抑制因子（NgR1、NOGO-A）及神经生长抑制因子等存在于梗死及发生坏死的半暗带区域，过度激活ROK，抑制神经复性及再生，说明ROK抑制剂对脑卒中恢复期有效。 抑制炎性反应，抑制脑卒中迟发性神经元丧失。 减少脑梗死体积和促进神经功能恢复 Rho 激酶抑制剂对急性缺血性脑卒中的作用 增加局部脑血流量，上调内皮细胞NOS活性，减少梗死体积。 Rho 激酶抑制剂对急性缺血性脑卒中的作用 Rho 激酶抑制剂对急性缺血性脑卒中的作用 Rho 激酶抑制剂对急性缺血性脑卒中的作用 国外的一项设计严格，前瞻性、双盲、对照临床研究证实，48h内应用盐酸法舒地尔可显著改善急性脑栓塞