植物原生质体组织培养.ppt

小结 原生质体融合是获得胞质杂种的理想途径。 体细胞杂交在远缘育种和新物种、新资源创造中具有深远意义。 原生质体融合技术主要有PEG融合及电融合 提高融合效率和融合细胞培养重复性是该技术研究的重点 思考题 1．原生质体、亚原生质体、微小原生质体和原生质球的概念。 2．为什么原生质体要培养在等渗培养基中？ 3．影响原生质体培养的主要因素。 4．原生质体的培养方法有哪些？各有何优缺点 5．为什么说原生质体培养系统是现代生物技术的载体？ 思考题 6．植物体细胞杂交的概念和类型。 7. 什么是细胞质工程？ 8．对称融合和非对称融合的概念及非对称融合的作用。 9．PEG融合与电融合的原理及影响因素。 10．杂种细胞的获得和选择方法。 * 崩溃酶是一种复合酶，内含昆布（海带）多糖酶(laminariose)、木聚糖酶(xylanase)和纤维素酶(cellu]ase)，消解细胞壁的能力强。来自担子菌。 离析酶的作用是分解植物组织中的果胶质，使粘结在一起的细胞离解成单个细胞。也称浸软酶、浸溶酶或细胞分离酶。 高质量的植物细胞离析酶应具有均衡的多种果胶酶成分，而且还应包含一种低分子蛋白质，这种蛋白质本身无果胶酶活性，但能增强果胶酶离析单细胞的作用。 * 根据植物组织的发育和结构，可分辨出细胞壁主要由如下三层组成:(a)中层或胞间层或物质，（b）初生健.(c)次生壁。 中层是将每个细胞连结在一起形成组织的连结物，因而，存在于相邻细胞的初生壁之间。它是一种不定形的物质对于偏振光无活性（向同性）。在支持组织中，它可以填充细胞间的空隙.中层主要由果胶质组成溶解果胶的果胶酶或化学试剂将组织分解为单个细胞，这个过程称为离析。 初生壁是在新细胞上发育的第一层真正的细胞壁。由于中层是细胞间的物质而不是壁所固有的，所以在许多细胞中初生壁是惟一的细胞壁。初生壁是在细胞内发育或某些仍在生长的细胞的某些部分发育的细胞壁。这层壁在光学上是活跃的（向异性）。 次生壁是在初生壁内表面形成的。它在已经停止生长的细胞内及细胞部分上开始发育。次生壁具有强烈的向异性，而且在其上可以观察到分层结构。 在大多数管胞和纤维细胞中，次生壁上可以分辨出三层—外层(s.)、中层(S2) 和内层（S3）在这三层中，中层是最厚的，然而在有些细胞中，层数也许还不只三层。有些研究者用第三生壁表示次生壁的内层。根据Frey-Wyssling的观点也许存在具有与次生壁不同特征的最内层。他认为这一层也许可以分化成两层—膜层和瘤层。 应该提到的是有些研究者在研究木本组织时使用复合中层一词，这一词特指木质化层的复合体。它们在没有前处理时，在光学显微镜下观察，表现出或多或少的同源。当涉及到中层和相邻初生壁时，复合中层也许就是三层；当涉及到中层本身、初生壁和相邻细胞的次生壁外层时，或许就是五层。 * Percoll是一种经聚乙烯吡咯烷酮(PVP)处理的硅胶颗粒，对细胞无毒性。 蔗糖聚合物称聚蔗糖（商品名为Ficoll），分子量为40kD，具有高密度、低渗透压、无毒性的特点。 * 胀破后留下的残迹是无形的。如果原生质体还带有部分细胞壁，则原生质体从无壁部分胀破，破碎后留下的残迹仍保持半圆形的细胞壁。 激发滤光片为420 nm 阻挡滤光片为530 nm 绿色荧光，有细胞壁。红色，无。 序号 产品名称 结构 性质 适用范围 1 荧光增白剂OB（C.I.184） 苯并恶唑型 外观：浅黄绿色结晶粉末 含量：≥99.0% 熔点：198-200℃ 本品广泛用于塑料、涂料、油墨、相纸等增白、增艳,效果极佳,且耐高温性能优异。 2 荧光增白剂OB-1（C.I.393） 苯并恶唑型 外观：淡黄色粉末 含量：≥99.0% 熔点：351-353℃ 适用于塑料，聚酯原液的增白，也适用于涤纶纤维和涤纶与棉及其它纤维混纺织物的增白。 3 荧光增白剂CBS-127（FP）（C.I.378） 二苯乙烯联苯型 外观：浅黄色结晶粉末 含量：≥99.0% 熔点：216-222℃ 用于PVC和聚苯乙烯系列产品的增白，也可用于其它热塑性塑料。 4 荧光增白剂ER（C.I.199） 双苯乙烯型 外观：黄绿色结晶粉末 含量：≥99.0% 熔点：230-234℃ 用于涤纶聚脂的增白，也可用于塑料增白 5 荧光增白剂ER-II（C.I.199:1） 双苯乙烯型 外观：黄绿色结晶粉末 含量：≥99.0% 熔点：182-184℃ 用于涤纶,涤棉,涤毛等混纺织物,醋酸纤维,锦纶的增白，也可用于塑料增白. 6 荧光增白剂KCB（C.I.367） 苯并恶唑型 外观：淡黄绿色晶体。 熔点：210-212℃ 含量：≥99.5% 用于合成纤维