动物实验的基本操作方法讲述.pptx

2017-3-25 1 动物实验的基本操作方法 2017-3-25 2 报告主要内容 实验动物的识别 抓取 标记方法 给药途径和方法 实验动物的麻醉 实验标本的采集 实验动物的处死 肿瘤大小测量 肿瘤细胞皮下接种 2017-3-25 3 如何判断小鼠性别 成年鼠性别很易区分，雄鼠的阴囊明显；雌鼠可见阴道开口和五对乳头。生殖器与肛门的距离也可判定，近者为雌性，中间无毛；远者为雄性，中间有毛。仔鼠或幼鼠则主要从外生殖器与肛门的距离判定。 2017-3-25 4 ♀ ♂ 2017-3-25 5 如何抓取小鼠 先用右手抓住鼠尾并提起，放在实验台上，在其向前爬行时，顺势用左手的拇指和食指抓住其两耳和头颈部皮肤，然后把鼠体翻转向上置于左手心中，把后肢拉直，用左手的无名指及小指夹住鼠尾部即可。对于操作熟练者，可采用左手一手抓住法，右手可不必放下注射器等工具。操作时应小心被小鼠抓咬。不同的操作也对应着不同的抓取方式，需在技能练习中慢慢体会。 2017-3-25 6 2017-3-25 7 如何标记小鼠 耳钉标记法：用左手食指及拇指抓紧鼠左耳及左半边脸和颈部，背部朝上，用酒精棉擦拭一下右耳，右手持装好耳钉的耳钉夹，将耳钉开口夹住尽量平展的右耳，最好夹住耳朵中部到根部的位置防止太边上容易脱落，用力握紧耳钉夹，使耳钉尖端扣入凹槽。注意动作要轻要稳以防用力过猛扯坏小鼠的耳朵；耳钉有数字的一面尽量朝外方便读数。建议两个人共同完成。 2017-3-25 8 如何标记小鼠 无耳钉标记法： 1、剪耳法 在小鼠双耳的不同部位上剪一三角口来表示不同号码。一般习惯是：左上为1，左下为2，右上为3，右下为4，左耳两刀为5，左右耳各一刀为6，右耳两刀为7，不剪为8 2、画尾巴法 一横为1，两横为2，三横为3，四横为4，一竖为5，一竖一横为6，一竖两横为7，一竖三横为8，一竖四横为9，不画为10。 2017-3-25 9 5# 9# 2017-3-25 10 实验动物的给药途径和方法 灌胃（po） 这是一种用处较多的给药方法。有些药物采用其他注射方法效果不好，而用此法反而效果好；有些药物（如临床上的口服药用于动物实验）不能采取静脉注射、肌肉注射等方法而必须采用此法。 1、经口给药 2017-3-25 11 2017-3-25 12 实验动物的给药途径和方法 用左手拇指和食指抓住鼠两耳和头部皮肤，将鼠抓持在手掌内，使其腹部向上，头部向上有一定的倾斜度，右手持注射器，从小鼠口角插入口腔，压其头部，使口腔和食管成一直线，再紧沿上腭和咽后壁慢慢插入食管，使其前端到达膈肌位置，然后把药液灌入胃内。灌时若很通畅，表示针头已进入胃内；若不通畅，动物有呕吐动作或强烈挣扎，表示针头未插入胃内，要立即拔出并按上述方法重操作。 2017-3-25 13 这种抓法不要抓得太紧，以免颈部皮肤向后拉，勒住食管，灌胃针不易插直或容易损伤食管；也不能抓得不紧，否则鼠在受压迫时容易挣脱掉而咬伤操作者的手指。也可用左手食指及拇指抓紧鼠右耳的方法来避免上述缺点 灌胃抓法 要点 2017-3-25 14 灌胃要点 动物要固定好；进针方向正确， 要沿着口角进针，再顺着食管方向插入胃内， 绝不能进针不顺而强行向里插，否则会捅破食管， 甚至注入肺内而造成动物死亡。 常用灌胃量为0.1-0.2ml/10g。 2017-3-25 15 实验动物的给药途径和方法 静脉注射（iv） 小鼠一般采用尾静脉注射 1、固定： 用小鼠固定器将小鼠固定好,将尾巴拉直，绷紧，这是成功的第一步。 2、注射给药 2017-3-25 16 实验动物的给药途径和方法 2、血管的选择：小鼠尾部有三条静脉，左右两边的静脉比较浅，容易穿刺；中间一条位置较深，建议不选择。穿刺先远后尽，不要一开始就从尾根部，这样的好处是万一一次扎不进，还可以继续使用此血管。选择尾下1/4-1/3处比较好（约距尾尖2-3cm，因为尾梢端皮薄静脉浅，易于刺入；但不可离尾尖太近，防止尾巴碎断或不好固定）。 2017-3-25 17 实验动物的给药途径和方法 熟练的话看哪里血管清晰就扎哪里。 一般用75%酒精反复擦拭穿刺血管，使其充盈，并且使皮肤角质层软化，利于穿刺。或者在注射之前用约50度温水泡大约2分钟，使血管充分舒张，用干棉球擦干。或者直接用手握住尾巴，用手心的温度使其血管充盈。 2017-3-25 18 实验动物的给药途径和方法 3、针的选择：4号1ml注射器 4、注射手法：注射时左手扯尾，用左手的食指,中指,无名指及大拇指将小鼠尾巴固定。右手持注射器，从中指及无名指与拇指接触处稍上方进针，进针时针尖朝下，使针头与尾部近似平行刺入尾静脉（针头与尾部夹角小于10°）在尾静脉内平行推进少许。针扎入时有落空感，针头沿血管进入，肉眼可关察到血液充盈针尖的那一瞬间，这是