1.1DNA重组技术的基本工具理科.ppt

乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷);转基因抗虫棉;专题一　基因工程;DNA重组技术的基本工具;基因工程的概念;基因工程的别名;基因工程培育抗虫棉的简要过程：;基因工程培育抗虫棉的关键步骤：;解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？;DNA 重组技术的基本工具;识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。; 大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。;限制酶;什么叫黏性末端？;;什么叫平末端？;;限制酶所识别的序列有什么特点？ 限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线,中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。 图1-1 限制酶识别序列的中心轴线;二、 “分子缝合针” —— DNA连接酶;磷酸二酯键 ;; T;; 答：不是一回事。基因工程中所用的连接酶有两种：一种是从大肠杆菌中分离得到的，称之为E·coli连接酶。另一种是从T4噬菌体中分离得到，称为T4连接酶。这两种连接酶催化反应基本相同，都是连接双链DNA的缺口（nick），而不能连接单链DNA。DNA连接酶和DNA聚合酶都是形成磷酸二酯键（在相邻核苷酸的3位碳原子上的羟基与5位碳原子上所连磷酸基团的羟基之间形成），那么，二者的差别主要表现在什么地方呢？ ;（1）DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段的末端上，形成磷酸二酯键；而DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，不是在单个核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键。 （2）DNA聚合酶是以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链；而DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来。因此DNA连接酶不需要模板。 此外，二者虽然都是由蛋白质构成的酶，但组成和性质各不相同。;外源基因;大肠杆菌质粒的分子结构示意图;作为运载体必须具备哪些条件？;课本知识回顾;DNA 重组技术的基本工具;限制性核酸内切酶;二、 “分子缝合针” —— DNA连接酶;基因进入受体细胞的载体;1.、下列实践活动包含基因工程技术的是 （　　） A.水稻F1花药经培养和染色体加倍，获得基因型纯合新品种 B.抗虫小麦与矮秆小麦杂交，通过基因重组获得抗虫矮秆小麦 C.将含抗病基因的重组DNA导入玉米细胞，经组织培养获得抗病植株 D.用射线照射大豆使其基因结构发生改变，获得种子性状发生变异的大豆;4.下图是基因工程中利用pBR322质粒（ 表示氨苄青霉素抗性基因，Telr表示四环素抗性基因）与抗病基因构建重组质粒的示意图，该质粒上的PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶的识别序列及切割位点见下表。结合图表，叙述错误的是（　　）;A.pBR322质粒、抗病基因和重组质粒的基本组成单位都是脱氧核苷酸? B.形成重组质粒时，应选用限制酶PstⅠ和EcoRⅠ对含抗病基因的DNA、质粒进行切割 C.一个质粒被限制酶EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ同时切割后可得到3个DNA片段和6个黏性末端 D.将受体细胞置于含有四环素的培养基上培养，可筛选出已导入抗病基因的受体细胞