青海峰谷分时电价表.doc.doc

牙周炎影响肥胖大鼠胰岛素抵抗机制的初步研究 博士研究生：倪佳 指导教师：章锦才 教授 摘 要 研究背景和目的 继口腔病灶学说之后，近十余年来研究者们运用分子生物学、基因学及蛋白组学等方法研究来深入探讨牙周感染和系统性疾病或异常状况之间存在的内在联系及相应机制，的大量研究结果表明，牙周感染可能是某些重要的系统性疾病或异常状况的一个重要的潜在危险因素，包括心血管疾病(动脉粥样硬化心肌梗死、及脑中风等)，早产及低体重新生儿，糖尿病，呼吸道感染等。1996年美国北卡罗来纳大学Offenbacher教授据此提出了牙周病学中的一个新的分支学科，即为牙周医学（periodontal medicine），以揭示牙周健康或疾病与全身健康和疾病之间的双向联系及其意义。 牙周炎低度炎症状态可以增加全身的炎症负荷, 这可能是因为慢性牙周炎是细菌引起牙周组织的慢性感染，在细菌及其毒性产物的作用下，造成牙周组织破坏，牙周袋内形成溃疡。重度的牙周炎牙周袋内的溃疡面积可达 72 cm2，相当于成人手掌大小，研究表明，这些牙周感染可通过三种不同的机制影响远隔器官或部位：1、细菌本身通过入血或淋巴等的迁移性感染，如拔牙、牙周治疗、咀嚼等均可引起短暂的菌血症(bacteremia)，在炎症的作用下引起血管通透性增加，因此刷牙、口腔治疗、甚至咀嚼硬物时很容易引起牙周致病菌及其毒素入血，形成一过性的菌血症引起并加重全身炎症反应；2、细菌的毒性产物直接引起的损伤，牙周致病菌及其毒性产物还可以刺激牙周组织局部表达 IL-6、TNF-α、PEG2等，这些炎症介质释放入血后进一步加重全身反应，使血清 CRP 水平升高；3、细菌感染引起的免疫损伤。 胰岛素抵抗是导致2型糖尿病和心血管疾病的主要危险因素，而肥胖又是胰岛素抵抗发生、发展的重要危险因素。随着社会经济的发展和生活水平的提高肥胖已经成为一种世界性流行病，脂肪组织增多和脂肪组织异常分布是导致胰岛素抵抗的重要原因。目前，普遍认为炎症是肥胖、胰岛素抵抗、糖尿病、等影响全身健康状态的发病机制之一，牙周炎和肥胖均为人群中最为广泛存在的疾病，因为共同的宿主炎症背景而发生关联，因此成为近年来牙周医学发展中的一个热点。此前已有很多研究表明，牙周炎与肥胖、甘油三酯增高、高密度脂蛋白胆固醇降低、高血压、高血糖之间存在不同程度的双向关联。但是关于牙周炎在预防糖尿病发生中的作用研究较少。在肥胖/胰岛素抵抗早期或者糖尿病前状态时牙周炎是否促进这些疾病的向糖尿病或心血管疾病发生发展？这些问题都尚未可知，因此，本实验建立肥胖动物模型探讨牙周炎影响肥胖大鼠向2型糖尿病发展的可能机制。从以下几个方面进行研究：1、分别建立牙周炎、肥胖及牙周炎复合肥胖大鼠模型。2、牙周炎对肥胖大鼠胰岛形态和功能的影响。3、炎症因子在牙周炎促进肥胖大鼠胰岛素抵抗中的作用。 第一部分 牙周炎、肥胖及牙周炎复合肥胖大鼠模型建立 目的： 分别建立牙周炎、肥胖及牙周炎复合肥胖大鼠模型。 方法： （1）建模：大鼠出生后，将同窝的雄性幼鼠随机平均分为四组A组（正常对照组）：不施加任何干预措施，普通饲料喂饲；B组（牙周炎组）：待12周龄后，肥胖模型成模同期给予牙周炎干预，腹腔注射10%水合氯醛（0.3mL/100g）麻醉，取仰卧位，大鼠四肢与头固定于手术架上，将大鼠舌牵出丝线捆绑固定，以防止窒息。将3.0丝线分别结扎于左、右上颌第一磨牙（molar 2，M2）及第二磨牙（molar 1，M1）牙颈部行丝线（3-0丝线，上海泰丝）结扎并尽量置于龈沟内(见图1)，将浓度为109CFU/mL的4种标准菌混合悬液接种于龈沟内，普通饲料喂饲，每周检查丝线一次，有脱落者及时重新结扎。建模时间为8周左右；C组（肥胖组）：于出生后第1天至第10天隔天在皮下注射谷氨酸钠（sigma）（3mg/kg体重）；所有大鼠21天哺乳期后均以常规鼠饲料喂饲，自由饮食水；建模时间为12周左右；D组(复合组)：肥胖建模处理同C组，12周时肥胖成模后给予与B组相同的处理。 （2）牙周炎模型检测：外观观察牙龈组织炎症变化，组织学检测及Micro CT扫描计算骨丧失水平，以上方法判断牙周炎模型。 （3）肥胖模型检测：测量体质量、体长、计算肥胖指数，检测血清血脂及血清空腹葡萄糖、空腹胰岛素，计算稳态模型下的胰岛素抵抗指数等。以上方法判断肥胖大鼠模型。 （4）牙周炎复合肥胖模型检测：综合牙周炎模型诊断及肥胖模型诊断方法判断牙周炎复合肥胖肥胖大鼠模型建立。 统计学处理（二级标题） 实验数据以均数±标准差来表示。应用SPSS? v13.0软件 (SPSS Inc., Chicago, USA)进行统计分析。各指标先进行正态性及Levene’s test方差齐性检验。两因素两水平数据比较采用2×2析因设计，分析两种干预交互作用、单独效