反胶团萃取分离技术.pptx

反胶团萃取分离冯么是胶团？胶团——是双亲（既亲水又亲有机溶剂）物质[表面活性剂]，在水或有机溶剂中自发形成的聚集体。胶团的形成——向水溶液中加入的表面活性剂达到一定浓度时，就会形成表面活性剂的聚集体，即胶团。 胶团的形成是表面活性剂自聚集的结果，是热力学稳定体系。胶团的分类正胶团——是在机型溶液中形成的，其亲水的极性向外指向极性溶液（比如水），疏水性（亲油性）的非极性“尾”向内相互聚集在一起。胶团的分类反胶团——两性表面活性剂在非极性有机溶剂中亲水性基团自发的向内聚集而成的，内核含有水分子，其非极性的疏水性尾部指向外，指向有机溶剂，极性的头部向内。 由于其表面活性剂的排列方式与正胶团相反，所以称为反胶团。反胶团的特异性功能反胶团常用表面活性剂：阴离子型：双-2-乙基乙基硫代琥珀酸（适合于小分子蛋白质萃取，分子量30kDa）阳离子型：氯化三辛基甲铵，十六烷基三甲基溴化铵非离子型：吐温85 反胶团的形状与大小 影响反胶团大小的因素决定反胶团大小的重要参数———反胶团的含水率W值 W=C水/C表 即“水池”中溶入水与表面活性剂的摩尔质量之比。实验证明，当W过大（W16）时，微水相就会与水的粘度相当，反胶团内会形成双电层；相反，当W过小时（W6-8），“水池”中的水与表面活性剂发生水化合，粘度大，流性差，且反胶团半径小，不易萃取蛋白质。 反胶团体系的分类单一表面活性剂反胶团体系 在使用时无需加入助剂的表面活性剂，具有多条中等长度长度的烷基尾和一个较小的极性头。阴离子型：如AOT(双-2-乙基乙基硫代琥珀酸)，该体系结构简单、稳定，反胶团体积相对较大，适合于等电点较高的相对分子量较小的蛋白质的分离。阳离子型：如CTAB（十六烷基三甲基溴化铵），该体系适用于等电点较低的相对分子量较大的蛋白质的分离。非离子型：能形成更大的反胶团体系，能分离相对分子量更大的蛋白质，但这类体系更容易乳化。 混合表面活性剂反胶团体系指两种或者两种以上的表面活性剂构成的体系。混合表面活性剂反胶团体系对蛋白质有更高的分离效率亲和反胶团体系体系中除了有组成胶团的表面活性剂外，还有具有亲和特性的助剂亲和配基与目标蛋白质有特异的结合能力，一般极少量亲和配基的加入会让萃取蛋白质的选择性大大提高。制备反胶团系统的方法注入法（注射法）将含有蛋白质额水溶液直接注入到含有表面活性剂的非极性有机溶剂中，而后进行搅拌形成透明溶液。优点：过程快、可以较好的控制反胶团的平均直径和含水量。相 转 移 发将含有蛋白质的水相与含有表面活性剂的有机相相互接触，在缓慢叫板下将一部分的蛋白质转入有机相中。 这种方法可以在有机溶剂相中得到较高的蛋白质浓度。溶解法将含有反胶团的有机溶剂与蛋白hi粉末一起搅拌，是蛋白质进入反胶团中。这种方法主要用于非水溶性蛋白质的溶解。谢 谢 聆 听 ！ ！ ！