国产化沙门氏菌免疫磁珠开发及其应用.docx

国产化沙门氏菌免疫磁珠开发及其应用 成果简介： 采用粒径100-800 nm纳米磁珠与沙门氏菌特异性抗体，通过碳 二亚胺缩合法制备沙门氏菌捕获分离用免疫磁珠，形成了已市场推广 的沙门氏菌免疫磁珠产品，目标菌捕获效率90%,高于市场同类产品 20%以上；将沙门氏菌免疫磁珠应用于牛奶中沙门氏菌的快速检测， 通过沙门氏菌免疫磁珠对样品中目标菌的特异性免疫捕获，用以优化 沙门氏菌常规检测前处理过程，磁分离获得的目标菌经过短时间(3h) 的增菌后，结合荧光定量PCR技术可在6h内完成对牛奶中可能存在 的沙门氏致病菌的检测，检测限为lT0CFU/25g，比国标法节省96h (4 d)的时间。免疫磁珠技术优势：采用粒径在100-800 nm范围内 且具有单分散性的磁性微球制备免疫磁球，具有更大的比表面积，有 利于固定更多的抗体，大大增加了表面抗原结合位点，更适用于微生 物大分子抗原的免疫识别捕获，大幅度提高了微生物的免疫识别性能, 该沙门氏菌免疫磁珠产品对1-10 CFU/mL捕获准确率达到100%o 检测方法技术优势：采用免疫磁分离沙门氏菌，而后进行目标菌 的短暂增菌，该技术优势使得目标菌从大量的杂菌中分离出来能够得 以在短时间内得到大量增殖，不仅提高了检测方法的准确性、灵敏性， 而且大大减少了前处理时间。荧光定量PCR技术本身的优势在于快而 准，与免疫磁分离技术优势相结合，使得检测方法更为快速、准确、 特异、灵敏。该免疫磁珠制备技术及免疫磁分离技术能进行高效捕获 成分复杂、浑浊的生物/环境样品中的痕量目标物，提高检测方法的 灵敏度及适用性，在医疗诊断、食品安全、环境分析等领域中痕量有 害物质灵敏检测具有广泛的应用前景。(2)建立的免疫磁分离技术 作为前处理技术不仅能与PCR技术相结合，而且还能与其他检测技术 相整合，如LAMP、数字PCR、ELISA等，使得各种检测技术应用性与 适用性更强、加广泛。 专利： 杜美红，孙永军，刘清勇，杨寅，陈婷，陈舜琮，一种检测样品中沙 门氏菌活菌体的方法，国家发明专利，专利号：ZL.0 奖项： (1)北京市科学技术研究院2014年度优秀科技成果奖-食品安全检 测微生物用免疫磁球的研发与应用；(2)中国分析测试协会科学技 术奖(青年奖)-基于免疫磁分离-多重荧光定量PCR的食源性致病 菌快速检测方法开发及应用。 北京市理化分析测试中心 Bey ng Ctntre For PhysK” ■ Chemtc? A/ugi BCPCA 单位：北京市理化分析测试中心 地址：北京市海淀仅永李产业髭地丰88中路7号衍化横BI54届 电话：010-mail: dumeihong@ 传H： 010邮编：100094 食源性致病菌检测 样品前处理解决方案 ?透用.IK荻律XOCFU/mL以上的活■教 ?透用.IK荻律XOCFU/mL以上的活■教■.港足PCR. RT PCR. LAMP. EUSAWSW?ttit? ?分SXK (15 min) O培养增假(2 h-4 h ) 产品名称 固定抗体 捕获■属 包装规格 ?m?ua 沙ncui? 200nm： 300nm 10?； 30?： 60次 ?nb-Sl?Twea? WM 200nm： 300nm 10?： 30tt； 60次 Mi^xobOW MHM XBHBO157 200 nm; 300 ran 10?； 30?： 60次 8此以0” H7 X?H?Ol57:Hy 200 5； 300 nm 10JX： 30次；60次 drMi - $^h((KX5 ^ur^us rMMa 200 m： 900 rvn 10?： 30*； 60次 anti - 200 nm; 300 m 10?： 30*： 60次 anti-bsferw .wiua 200 m： 900m 10?： 30?； 60次 Mi-Sh/golU 200 5； 300 nm 1(Wt； 30?； 8次 ?nbCs(T^do6?cfer fiMWM 200nm：300nm 10?： 30A： 60次 dMi-te9?onWU ?RM9US 200nm：300wn 10?： 30?； 60次 anti-f/MerobKftr 200 nm; 300 nm 10?: 30?； 60次 IMSWammurxxtwgnetK BexHMM1］产品 免疫磁分离前处理技术 采用lai球 ■特睥a合的免疫磁珠.通过免原噎分肩技术对符本中的目标is行免疫擢秩.在一定 曲时件下卖IC目惊8B的分免段皿与■体■剖液地鼻液中增算,目稣■焉以快速■殖.该投术 i用于合昧 球境中沙门％密、金黄XftHBO157:H7.单仗《8生季I丽■.阪峰麟歼? 等炒■的岭刑