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发酵纳豆中加入中药后对纳豆激酶活力的影响 纳豆芽孢杆菌 (Bacillus natto)是从日本的传统发酵食品 纳豆中发现并分离出来的, 属细菌科芽孢杆菌属, 其原始菌 株与枯草芽孢杆菌相同, 是枯草芽孢杆菌的一个亚种 [1] 。纳豆 激酶 (Nattokinase, NK; 也称 Subtilisin NAT, Subtilisin BSP)是 由纳豆菌(Bacillus subtilis var. natto)产生的一种具有强烈溶 栓功能的蛋白酶。该酶是由日本学者于 1987 年首次在日本 传统食品纳豆中提取出来并命名的 [2] 。10 余年来, 研究者们 对纳豆激酶的理化特性、作用机制及生产工艺等方面进行了 较为详尽的研究。实验研究证实该酶不仅易于提取纯化, 成 本低廉, 溶栓效果好, 作用迅速, 药效时间长, 而且安全性好, 无任何毒副作用 [3,4] , 较目前已开发研制的一些溶栓药物如尿 激酶 (Urokinase, UK)、链激酶 (Streptokinase, SK)、组织型纤溶 酶原激活剂 (tissue- type plasminogen activator, t- PA)等具有独 特的优越性, 有望成为一种新型溶栓药物。目前, 国内尚未见 纳豆芽孢杆菌发酵中加入中药后对提高纳豆激酶活性影响 的报道。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 菌株 枯草芽孢杆菌由本院提供; 大豆购自北大荒粮油 公司, 为非转基因大豆( 直径≤5 mm) 。 1.1.2 中药 苦参、板蓝根、漏芦、红花均由本院中药房提供。 1.1.3 试剂 尿激酶 1 000 U/支( 哈高科白天鹅药业集团公司 产品)、纤维蛋白原 100 mg/支(Sigma, 每毫克含 75%可凝固 蛋白) 、琼脂糖( 上海东海制药厂)、凝血酶(1 000 U/支)、磷酸 氢二钠、磷酸二氢钠、氯化钠。 1.2 方法 1.2.1 原材料的处理 将中药切片, 去除杂质, 清水浸泡使含 水量在 55%~60%。将大豆浸泡 8 h, 沥干水, 备用。 1.2.2 液体菌种的制备 将斜面种转接入灭菌后的 PDA 液体 培养基内摇床培养(转速为 140 转/min)24 h。 1.2.3 发酵基质的制备 将浸泡好的中药分别称取 50 g 装入 聚乙烯袋中, 然后称取 50 g 浸泡过的大豆分别装入中药袋 内, 摇匀。另设对照组 100 g 大豆, 高压 121℃灭菌 40 min, 备 用。 [摘要] 目的: 通过对纳豆发酵中加入中药苦参、板蓝根、漏芦、红花后纳豆激酶活力的改变进行研究, 从而筛选出能 够提高纳豆激酶活力的中药, 同时也将中药之药性融入其中, 以便更好地提高纳豆之医疗、保健功能。方法: 本实验 采用纤维蛋白- 琼脂糖平板法测定发酵后产物中纳豆激酶的活力大小。结果: 苦参、板蓝根可提高纳豆激酶活性, 漏 芦可降低纳豆激酶活性, 红花可抑制枯草芽孢杆菌的生长使之没有活性。结论: 发酵纳豆中加入中药后对纳豆激酶 的活力有不同程度的影响。 [关键词] 纳豆芽孢杆菌; 纤维蛋白- 琼脂糖平板法; 纳豆激酶; 中药 [中图分类号] R932 [文献标识码] A [文章编号] 1673- 7210(2008)03(c)- 036- 02 The experimental study of the influence of the fermented natto added into traditional Chinese medicine on the activity of nattokinase(NK) JIAO Xiao- li, SUN Yan- ping* (Heilongjiang Academy of Traditional Chinese Medicine, Harbin 150036, China) [Abstract] Objective: To study the influence of the fermented natto added into traditional Chinese medicine- Radix sophorae flavescentis, Radix isatidis seu baphicacanthi, Radix rhapontici seu Radix echinopsis and Flos Carthami on the activity of nattokinase (NK), then the traditional Chinese medicine that can improve the activity of nattokinase(NK) is screened and its proper