实习二 Vc含量的测定.ppt

实习二 果蔬中还原性维生素C的含量测定 维生素C是一种己糖醛基酸，有抗坏血病的作用，所以又称作抗坏血酸。维生素C广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑桔等食品中含量尤丰富。 维生素C具有较强的还原性，对光敏感，氧化后的产物称为脱氢抗坏血酸，仍然具有生理活性。进一步水解则生成2，3 -二酮古乐糖酸，失去生理作用。 目的 学习和掌握用2,6-二氯酚靛酚滴定法测定植物材料中抗坏血酸含量的原理与方法。 原理 2,6-二氯酚靛酚是一种染料，在碱性溶液中呈蓝色，在酸性溶液中呈红色。抗坏血酸具有强还原性，能使2,6-二氯酚靛酚还原褪色，其反应如下： 当用2,6-二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，滴下的2,6-二氯酚靛酚被还原成无色； 当溶液中的抗坏血酸全部被氧化成脱氢抗坏血酸时，滴入的2,6-二氯酚靛酚立即使溶液呈现红色。因此用这种染料滴定抗坏血酸至溶液呈淡红色即为滴定终点，根据染料消耗量即可计算出样品中还原型抗坏血酸的含量。 1．实验材料 取新鲜水果（蔬菜）样品100g，加100g 2％草酸溶液，用研钵制成匀浆。过滤，弃滤渣，称取10g匀浆，移入100mL容量瓶，用1％草酸定容至刻度，摇匀后静置备用。 实验材料、主要仪器和试剂 2．仪器 （1）电子天平 （2）研钵 （3）容量瓶（100mL） （4）刻度吸管（1mL，5mL，10mL） （5）锥形瓶（250mL） （6）滴定管 3．试剂 （1）2％草酸 （2）1％草酸 （3）标准抗坏血酸溶液（0.1mg/mL） （4）2,6-二氯酚靛酚溶液 （5）1%的淀粉溶液 （6）0.1000%mol/L碘酸钾标准储备液 （7）0.001%mol/L碘酸钾标准应用液 （8）6%的KI溶液 1.2,6-二氯酚靛酚溶液的标定： (1)抗坏血酸标准溶液的标定：确吸取2.0mL抗坏血酸标准液于100mL锥形瓶中，加5mL 1％草酸溶液，6%的KI溶液0.5ml，1%的淀粉溶液2滴，再以0.001%mol/L碘酸钾标准应用液滴至淡蓝色。 抗坏血酸浓度（mg/ml）= （耗0.001%mol/L碘酸钾ml数*0.088*6）/2 操作步骤 (2)二氯酚靛酚溶液的标定：吸取已标定过的抗坏血酸溶液5ml及1%的草酸5ml于锥形瓶中，以待标定的2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至溶液呈淡红色，在15``内不褪色为止。 1ml染料相当于抗坏血酸的毫克数（记作T）= （坏血酸浓度（mg/ml）*5）/滴定消耗染料毫升数 2．样品测定：准确吸取样品提取液（上清液或滤液），每份5.0mL，分别放入锥形瓶中，按上面的操作进行滴定并记录所用染料溶液体积（mL）,平行操作三次，取平均值。 V —— 滴定样品提取液消耗染料平均值（mL） T —— 每mL染料所能氧化抗坏血酸mg数 G —— 匀浆总重量（g） G1 —— 制备提取液取用匀浆重量（g） A —— 样品提取液定容体积（mL） A1 —— 滴定时吸取样品提取液体积（mL） W —— 样品重量（g） 结果计算 注意 1.操作要尽可能快，并防止与铁铜器具接触，以减少VC的氧化。 2.样品提取液避免强光直射。 3. 草酸具有抑制氧化酶，保护VC作用。草酸在颜色反应中还提供了酸性条件。 * 1.本实验操作的注意事项及结果分析？ 2.用滴定法测定果蔬中VC的含量有什么优缺点? * 滴定终点红色 在滴定管中弱碱性的2，6-二氯酚靛酚染料是蓝色的。染料滴入锥形瓶中，草酸使染料变成弱酸性，再与VC作用被还原成无色。随着染料用量增加， VC还原能力下降，直到终点，溶液由无色?红色。染料滴定消耗的量与瓶中的VC浓度成正比。 * * 在滴定管中弱碱性的2，6-二氯酚靛酚染料是蓝色的。染料滴入锥形瓶中，草酸使染料变成弱酸性，再与VC作用被还原成无色。随着染料用量增加， VC还原能力下降，直到终点，溶液由无色?红色。染料滴定消耗的量与瓶中的VC浓度成正比。 * *