与肝癌细胞共培养的T淋巴细胞DNA羟甲基化的免疫细胞学研究.doc

项目编号： 国家级大学生创新计划 项目申报书 项目名称：与肝癌细胞共培养的T淋巴细胞DNA羟甲基化的免疫细胞学研究 起止时间：2013.06-2014.06 所在学院：右江民族医学院 项目负责人：刘鑫 指导教师：农嵩、李根亮 填报日期：2013.5.13 右江民族医学院学工处制 2013年制 填报说明 1、申报书适用于国家级大学生创新计划项目申报，申请书所列各项内容均须实事求是，认真填写，表达明确严谨，简明扼要； 2、申报书填写要求用A4纸打印。一式三份由各学院经初评签署意见后统一报送学工处，同时报送电子文档； 3、未尽事宜，可另附材料说明； 4、项目编号一项不填。 一、基本情况 项目 名称 与肝癌细胞共培养的T淋巴细胞DNA羟甲基化的免疫细胞学研究 所属 学科 表观遗传学 申请 金额 元 起止年月 年 月至 年 月 主持人 姓名 刘鑫 性别 男 民族 汉 出生年月 1990年 4月 学号 1520110101 联系 电话 指导 教师 农嵩 联系 电话 办公： 手机: 主持人曾经参与科研的情况 QJCX201334 项目类别：区级创新项目 时间：2012.06-2013.12 指导教师承担科研课题情况 在研课题（主持） 1. 基于5羟甲基胞嘧啶的中华绒螯蟹非浓缩核精子发生机制，2013.01-2016.12，国家自然科学基金项目 2. 边境地区民族医科院校大学生正确人生观养成的教育对策研究（2013JGA203），2013.03-2015.02，广西高等教育教学改革工程项目 3. DNA甲基化在职业暴露致男性不育中的作用（YK2012002），2012.03-2015.02，右医博士科研启动项目 指导教师对本项目的支持情况 实验设备、场所等的保障、实验技术和方法及论文写作的指导等。 项目 组 主要 成 员 姓 名 学号 专业班级 所在学院 项目中的分工 刘鑫 1520110101 2011级护理学本科班 护理学院 协调实验研究；论文写作；免疫定位和定量 李春燕2010级临床本科班 临床学院 数据整理及分析比较 尹加伟 1320100209 2010级影像本科2班 医学影像系 负责收集相关材料，并撰写论文。进行相关实验，细胞培养。 二、项目研究的目的和主要研究内容 1、研究的目的 通过免疫细胞学的方法研究与肝癌细胞共培养的不同培养阶段的T淋巴细胞DNA羟甲基化的变化，分析T淋巴细胞DNA羟甲基化与肝细胞癌的相关性，为肝细胞癌与细胞免疫反应相关性的研究提供基础资料。 2、主要内容 （1）T淋巴细胞与肝癌细胞共培养； （2）不同共培养阶段的T淋巴细胞内DNA羟甲基化位点的免疫定位和定量； （3）比较不同共培养阶段T淋巴细胞DNA羟甲基化的变化，分析T淋巴细胞DNA羟甲基化与肝细胞癌引起的细胞免疫反应的相关性。 三、国、内外研究现状和发展动态（附参考文献） 肝癌是高度恶性的肿瘤之一，患者死亡率高，我国每年死于肝癌的患者占全世界肝癌死亡人数的一半左右。细胞免疫反应在防治肝癌发生方面起着重要的作用。在肝癌发生过程中，T淋巴细胞被激活后转化为淋巴母细胞，并迅速增殖、分化，其中一部分在中途停下不再分化，成为记忆细胞；另一些细胞则成为致敏的淋巴细胞，其中Tc有杀伤力，使外源细胞破裂而死亡。因此，细胞免疫不仅准确高效杀灭肿瘤细胞，还能激发机体产生抗肿瘤免疫反应，从而使免疫系统，发挥正常作用以杀死肿瘤细胞，并启动免疫监视，防止肿瘤的转移和复发。另外，临床上也可以通过提取病人体内不成熟的免疫细胞，在体外进行培养后，然后回输到病人体内，用于治疗肝癌。因此，研究细胞免疫与肝癌的相关性对于人类更好地的防治肝癌具有重要的意义，也可为人类优化肝癌防治的免疫策略提供基础临床指导。 在肝癌引起的细胞免疫反应中，大量效应T淋巴细胞表达多种细胞因子及其他功能蛋白，参与细胞免疫反应过程。而相关基因的表达与基因的羟甲基化密切相关，但有关肝细胞癌引起的细胞免疫反应过程中T淋巴细胞DNA羟甲基化的相关研究还未见报到[1，2]。 DNA羟甲基化是最近三年来表观遗传学领域研究的新热点。DNA羟甲基化是一种复制后表观遗传修饰，是Tet（Ten-Eleven-Translocation，10-11易位) 蛋白催化下5甲基胞嘧啶（5-methylcytosine，5mC）形成5羟甲基胞嘧啶（5-hydroxymethylcytosine，5hmC）的结果。5hmC的研究由于2009年Tet蛋白催化5mC形成5hmC功能的发现而倍受关注[1]。5hmC被称为DNA的第6种碱基