技能培训库 细菌简单染色 细菌的简单染色.pptx

食品质量与安全专业教学资源库The teaching resource library of food quality and safety《技能培训库》细菌的简单染色主讲教师： 王娟河南农业职业学院目录Contents1实训目的和原理2实训材料及器材3实训方法和步骤4实训结果与讨论5实训评价一、实训目的和原理1实训目的23一、实训目的和原理简单染色法——单一染料对菌体进行染色。本法操作简便， 适用于菌体一般形态的观察。细菌体积小，较透明，如未经染色常不易识别，而经着色后，与背景形成颜色对比，易于观察。染料是一类苯环上带有发色基团和助色基团的有机化合物。发色基团赋予染料颜色特征，助色基团使染料能形成盐。常用的细胞染料都是盐，分酸性染料和碱性染料两大类：美蓝（亚甲基蓝）、结晶紫、碱性复红、番红（沙黄）、孔雀绿等属于碱性染料；酸性复红、依红及刚果红属于酸性染料。实训原理一、实训目的和原理细菌细胞在中性、 碱性或弱酸性溶液中带负电荷，常用碱性染料进行染色。碱性染料电离时染料离子带正电荷，易与带负电荷的细菌结合而使细菌着色。细胞处于酸性条件下（如细菌分解糖类产酸），所带正电荷增加，可采用酸性染料染色。实训原理二、实训材料及器材1.金黄色葡萄球菌，枯草芽孢杆菌。2.显微镜，酒精灯，载玻片，接种环，香柏油，二甲苯，擦镜纸，生理盐水，嗜碱性美蓝染色液，石炭酸复红染色液。金黄色葡萄球菌枯草芽孢杆菌三、实训方法和步骤干燥固定涂片染色镜检水洗三、实训方法和步骤(1)涂片 取两块干净的载玻片，各滴一小滴生理盐水于载玻片中央，用无菌操作，分别挑取金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌于两块载玻片的水滴中 (每一种菌制一片)，调匀并涂成薄膜。注意滴生理盐水时不宜过多，涂片必须均匀。(2)干燥 于室温中自然干燥或在火焰上过让其干燥,但注意玻片不能烫手。(3)固定 为了使细胞细胞质凝固，从而固定细菌的形态，并使其不易脱落。就将涂片面向上， 于火焰上通过2~3次，但不能在火焰上烤，以玻片不烫手为准，否则细菌形态将毁坏。三、实训方法和步骤(4)染色 将染色液滴加于菌斑上并覆盖菌斑，染色时间长短随不同染色液而定。吕氏碱性美蓝染色液染2~3min，石炭酸复红染色液染1~2min。(5)水洗 染色结束后，用蒸馏水或自来水漫过菌斑，注意冲洗水流不宜过急，过大，水由玻片上端流下，避免直接冲在涂片处，直至流下的水无色为止。水洗后将标本晾干或用吹风机吹干，待完全干燥后才可置油镜下观察。（6)镜检 使用显微镜进行观察。三、实训方法和步骤1.加热固定时要使用载玻片夹子，以免烫伤，不要将载玻片在火焰上烧烤时间过长, 以免载玻片破裂，菌体变形。2. 实验完毕后洗手，金黄色葡萄球菌为条件致病菌，二甲苯为有毒物质。四、实训结果与讨论1.绘出两种细菌形态图的示意图。2.根据实验体会，你认为制备染色标本时，应注意哪些事项？枯草芽孢杆菌金黄色葡萄球菌五、实训评价方法1.结果评价绘制示意图及评价实验报告书写质量。2.过程评价过程评价见下表?????? 表1 过程评价 评分项目显微镜使用（2分）制片（1分）观察（2分）种类鉴别（3分）学习态度（2分）分值谢谢观看！Thank you for watching河南农业职业学院霉菌的形态特征包括培养特征（宏观特征）和镜下特征（微观特征），有时根据特殊需要再进行一些生理特性方面的辅助实验。如若观察霉菌自然生长状态下的形态，常用载玻片观察，就是将霉菌孢子接种于载玻片上的适宜培养基上，培养后用显微镜观察。如果想要得到清晰、完整、保持自然状态的霉菌形态也可以利用玻璃纸透析培养法进行观察。此法是利用玻璃纸的半透膜特性及透光性，使霉菌生长在覆盖于琼脂培养基表面的玻璃纸上，然后将场长菌的玻璃纸剪切一小片，贴放在载玻片上用显微镜观察。(1)涂片 取两块干净的载玻片,各滴一小滴生理盐水于载玻片中央,用无菌操作, 分别挑取金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌于两块载玻片的水滴中 (每一种菌制一片), 调匀并涂成薄膜。注意滴生理盐水时不宜过多，涂片必须均匀。(2)干燥 于室温中自然干燥或在火焰上过让其干燥,但注意玻片不能烫手。(3)固定 为了使细胞细胞质凝固,从而固定细菌的形态,并使其不易脱落。就将涂片面向上, 于火焰上通过2~3次，但不能在火焰上烤，以玻片不烫手为准， 否则细菌形态将毁坏。(4)染色 将染色液滴加于菌斑上并覆盖菌斑, 染色时间长短随不同染色液而定。吕氏碱性美蓝染色液染2~3min，石炭酸复红染色液染1~2min。(5)水洗 染色结束后，用蒸馏水或自来水漫过菌斑，注意冲洗水流不宜过急，过大，水由玻片上端流下，避免直接冲在涂片处，直至流下的水无色为止。水洗后将标本晾干或用吹风机吹干，待完全干燥后才可置油镜下观察。（6)镜检 按技能训练三进行显微镜观察。(1)涂片 取两块